Maspin基因的表观遗传学修饰对绒毛外滋养细胞功能的影响

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目的检测正常孕妇及子痫前期患者胎盘中maspin基因的表达情况,探讨maspin基因在子痫前期发病机制中的作用。方法采用免疫组织化学法检测正常孕妇和子痫前期患者胎盘中maspin基因的蛋白表达情况,并采用RT-PCR法检测maspin基因的mRNA表达水平。结果1. maspin蛋白在子痫前期患者及正常孕妇胎盘组织中均有表达,主要位于合体滋养细胞、细胞滋养细胞及内皮细胞胞浆中。2.子痫前期组胎盘中maspin mRNA表达水平与正常组相比明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。两组孕妇年龄、身高、孕龄、胎儿Apgar评分和体重均无统计学差异。结论胎盘组织中maspin基因主要表达在滋养细胞,子痫前期患者胎盘maspin表达明显升高。我们推测maspin基因表达水平的异常可能参与了子痫前期的发生。目的体外实验研究缺氧状态对绒毛外滋养细胞maspin表达及生物学行为(增殖、迁移、凋亡)的影响,探讨maspin基因参与子痫前期发病的机制。方法利用化学物质二氯化钴建立细胞缺氧模型,采用细胞免疫组化、实时荧光定量PCR、CCK8细胞增殖实验、Transwell细胞迁移实验和细胞凋亡检测研究绒毛外滋养细胞maspin蛋白的表达变化及对绒毛外滋养细胞生物学行为(增殖、迁移和凋亡)的影响。结果1. maspin蛋白在绒毛外滋养细胞株TEV-1中明显表达,主要位于细胞浆2.与正常对照组相比,缺氧组中绒毛外滋养细胞的maspin的mRNA表达明显增加;增殖能力和迁移能力明显下降,凋亡显著增加。结论缺氧状态下滋养细胞maspin表达增加,其浸润性行为明显受到抑制,这与子痫前期胎盘中maspin表达情况及滋养细胞侵袭能力下降的现象一致,因此推测maspin基因表达异常与滋养细胞的浸润性能力改变相关,参与子痫前期的发病机制。目的利用脱甲基化药物(5-Aza-dC)研究绒毛外滋养细胞生物学行为(增殖、迁移和凋亡)的变化,探讨maspin基因的表观遗传学调控在子痫前期发病机制中的作用。方法采用实时荧光定量PCR、CCK8细胞增殖实验、Transwell细胞迁移实验和Annexin/PI凋亡检测等方法检测脱甲基化药物对绒毛外滋养细胞的maspin mRNA表达及增殖、迁移和凋亡的影响。结果1.与PBS对照组相比,5-Aza-dC组中绒毛外滋养细胞的maspin mRNA表达显著升高,迁移能力明显下降,而增殖和凋亡率没有明显改变。2.与缺氧组相比,缺氧+5-Aza-dC组中绒毛外滋养细胞的maspin mRNA表达明显降低,早期凋亡率有一定程度的降低,但增殖能力没有明显改变结论脱甲基化药物使绒毛外滋养细胞的maspin表达明显增加,并抑制其迁移能力;同时抑制了缺氧导致的绒毛外滋养细胞凋亡的增加,提示了表观遗传学调控在子痫前期胎盘浅着床发生机制中的作用,并为子痫前期的早期诊断和治疗提供了新的潜在的研究方向。
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