斑污拟盘多毛孢菌激活蛋白的分离纯化及其生物活性的研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ljyxq13571302523
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
激活蛋白(Activator protein)是从多种病原真菌中分离的具有诱导植物抗病性、增强抗逆能力、促进植物生长等生物活性的一类新型蛋白激发子。激活蛋白能显著增强植株对多种重要植物病原体的系统广谱抗性,且其诱抗效力强。目前对斑污拟盘多毛孢菌(Pestalotiopsis maculans (Cda.) Nag Raj)菌丝体内胞内可溶性激活蛋白的研究尚未见报道。本研究以斑污拟盘多毛孢菌为实验材料,通过硫酸铵分级分段沉淀结合凝胶过滤层析,从斑污拟盘多毛孢菌菌丝体中分离纯化获得分子量17.7kDa有激活生物活性的蛋白。生物活性测定表明,该蛋白可显著提高玉米、白菜、黄瓜、豌豆种子的发芽率和根长生长,并可促进豌豆、玉米幼苗植株生长,提高豌豆、玉米幼苗叶片叶绿素含量,提高豌豆、玉米幼苗的根冠比和根系活力。本研究获得了以下研究成果:1.通过用滤液和蛋白粗提液处理玉米、白菜、黄瓜、豌豆种子,发现斑污拟盘多毛孢菌能够产生可以促进一些种子萌发和根长生长的有激活生物活性的成分,并且此激活成分存在于蛋白粗提液中。本研究采用硫酸铵分级沉淀法对蛋白粗提液进行盐析,然后对硫酸铵沉淀所得上清液和沉淀进行生测,生测结果显示上清液没有活性,沉淀有活性,证明活性物质存在于沉淀中,说明有激活活性的物质可能属于大分子类蛋白质,可能是斑污拟盘多毛孢菌菌丝体组成组分的胞内可溶性蛋白,从而为进一步分离纯化奠定基础。2.由实验可知激活蛋白存在于斑污拟盘多毛孢菌菌丝体内,为了在最短的时间内尽可能地获取最多的菌丝,本研究从接种量、培养时间、温度、溶氧量、摇床转速、pH六个因素对斑污拟盘多毛孢菌在振荡培养条件下产菌丝量进行优化选择。以上六个培养条件分别达到最优,组合起来即为最佳振荡培养条件。实验得到温度25℃,pH为6,三个菌饼接种到200mL培养液振荡培养11d,这样的培养方案菌丝产量最大且最经济。3.采用硫酸铵分级分段沉淀法对斑污拟盘多毛孢菌蛋白粗提液进行盐析,得到其盐析的最适饱和度为60%。此粗提物经Sephadex G-75凝胶细柱子层析后得到两个峰,其中峰2为活性峰。将峰2集中收集浓缩再过Sephadex G-75凝胶粗柱子层析后获得7个峰,其中峰2-7经检测有活性,SDS-PAGE电泳检测该峰为单一条带,以相对迁移率(mR)算得该蛋白的分子量为17.7kDa。4.研究纯化蛋白的生物活性,研究其处理种子后对豌豆、玉米的发芽率,根长生长,植株生长,叶绿素含量,根冠比,根系活力的影响。斑污拟盘多毛孢菌激活蛋白纯化样品处理豌豆、玉米种子后使豌豆、玉米种子的发芽率分别提高了8.84%、8.17%,根长分别提高了33.20%、39.75%,以及豌豆、玉米幼苗的株高提高了18.06%、26.33%,叶绿素含量分别提高了21.22%、18.21%,根冠比分别提高了84.62%、21.74%,根系活力分别提高了28.57%、66.67%,促进了植株生长。
其他文献
局部放电是引起PWM变频电机绝缘在高频连续脉冲条件下发生老化的重要因素之一,严重时将导致电机绝缘的击穿。由于高频连续脉冲的上升时间为ns级且幅值为k V级,故既加剧了电机
8月12日,2014年谷歌合作伙伴大会今日在京召开。谷歇在会上阐释了广告业的三大变革,以及如何重构内容、互联方式和广告,同时向广告主推出PMP私有交易市场,提供首选交易和私有竞价
人们常以为,领导品牌优势明显,对高科技公司而言更是这样,因为消费者一旦习惯它的产品与用户界面,就不会轻易放弃,转移到其他公司的产品或用户界面,消费者需要重新学习,要付出较大的
针对容量有限、光储单元容量较低的中小功率船舶光柴储交流微电网系统的稳定性问题,提出基于光储逆变器的船舶光柴储交流微电网多级控制策略。建立由柴油发电机组模型、光储
清代是河南书院发展史上一个重要的时期,伴随着书院的官学化,清代河南书院实现了自己的普及化,先后设置的292所书院已遍布省内各个州县。与明代相比,开封府仍然是书院分布最
由鑫宝源影视公司出品、赵宝刚总导演的2014年全新医疗大剧《青年医生》目前曝光首组剧照,第一次全方位展示了这部以实习医生为视角、青年医生的工作和生活的故事。主创有任重
该文针对寝室长在寝室建设寝室管理中的重要作用进行阐述,从方方面面发掘寝室长的作用。同时,也阐述了和谐的寝室关系对建立良好的寝室文化的影响,寝室长是寝室文化的倡导者,
传统的串级调速系统功率因数比较差的一个重要原因就是通过采用改变逆变器的移相控制角来对电机进行调速,控制角越大,则逆变器从电网吸收的无功功率越多。如果用斩波器来控制
周末下厨,晓青端着最后一道压轴菜“红烧排骨”摆上餐桌。面对香气四溢的菜肴,众人纷纷提起筷子准备开动。“等一下!”晓青摆手,大家不解地停下动作望着她。“嘿嘿!先拍个照发到
目的:探讨与对比不同清洗剂清洗医疗器械的效果。方法:2015年1月到2015年7月选择常规使用的医疗器械520件,根据随机抽签法分为观察组与对照组各260件,对照组采用中性多酶清洗