粗柄鸡枞菌的生态习性及菌丝体培养研究

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鸡枞菌(Termitomyces),隶属于真菌界、担子菌门、担子菌纲、伞菌亚纲、伞菌目、离褶伞科、蚁巢伞属,因其与大白蚁亚科中的土白蚁形成特殊的外共生关系,又被称为蚁枞、蚁巢伞等,它是一种世界珍稀的名贵药食用大型真菌,其不仅食味鲜美,并具有抗氧化、增强人体免疫力等诸多药理特性。鸡枞菌与白蚁的共生机理尚未完全弄清,目前还无法进行人工栽培。  云南省鸡枞菌种类繁多,分布广泛,但近年随着资源的减少,价格也连年上涨。本研究以云南省禄劝等地的粗柄鸡枞菌[Termitomycesrobustus(Beeli.)Heim]为研究对象,通过实地观测及蚁巢的室内移置跟踪观察,对鸡枞菌的生态、与白蚁的共生关系进行了初步探讨;并从子实体诱导分离出菌丝体,对菌丝体的培养条件进行了优化,这为今后进一步阐明鸡枞菌与白蚁的共生机理,为鸡枞菌菌丝体的规模化培养等奠定了重要基础。  本文主要研究结果如下:  1.对选自云南省禄劝、富民、武定等县的18个蚁巢进行了实地观测及统计表明,蚁巢平均温度为19℃,湿度为52%,pH为4.4。  2.对野外及人工移置蚁巢的研究表明,蚁巢菌圃如海绵状,形似蜂巢,主要由木质素(30-35%)、纤维素(15-20%)、土壤颗粒、鸡枞菌菌丝、工蚁的半消化物等成分组成;盛年期的菌圃为灰白色,质地坚硬,其上着生较多的小白球,供白蚁取食;白蚁对破损蚁巢具有较强的修复能力,它能利用分泌的唾液,将泥土搅拌成黏粘性的白蚁泥,用以逐渐封闭破损的蚁巢四周;在废弃或白蚁大量死亡的蚁巢,因为失去了白蚁的调节作用,炭角菌便成为优势生物很快占据蚁巢;在白蚁大量死亡后的移置蚁巢中,萌发出了三种炭角菌,分别是X.escharoidea、X.ochraceostroma和X.angulosa;利用IPDM培养基可分离纯化出炭角菌菌丝,菌丝3-5天可长满培养皿,生命力极强,并在30天左右形成棒状子实体。  3.利用ITS分子标记技术,对子实体和分离菌丝体的rDNA进行了提取、PCR扩增及测序,并与GenBank中相关种类进行序列比对,表明所分离菌丝来源于粗柄鸡枞菌子实体。  4.从碳源、氮源、C/N比等方面对菌丝体的基本培养基进行了优化,结果表明,较适宜的碳源为2.5%的麦芽糖;氮源为0.3%的酵母膏;麦芽糖与酵母膏的浓度比为10∶1。  5.以筛选出的最适培养基进行液体培养,振荡条件下形成晶莹圆润的菌丝球,静置条件下形成块状的板结菌丝,液体培养相较于固体培养能缩短培养周期。
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