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巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF,CSF-1)是最早被发现的造血生长因子,它能促进造血祖细胞分化成单核巨噬细胞,并维持单核巨噬细胞生长、增殖、分化。M-CSF可以由多种细胞产生,包括单核巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞及子宫内膜细胞等。而且在许多肿瘤细胞表面都可以表达M-CSF,包括乳腺肿瘤、卵巢肿瘤及子宫内膜癌。巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR,CSF-1R)属酪氨酸激酶受体家族成员,是原癌基因c-fms的蛋白产物。一旦c-fms癌基因发生点突变时,M-CSFR可通过自分泌、旁分泌或内分泌的机制引起细胞的生长、分化异常及恶性转化。在卵巢癌、前列腺癌、肝癌和白血病细胞都发现了M-CSFR的异常高表达,而且表达的程度与肿瘤的分级及预后相关。以往的研究表明M-CSF不仅在造血系统起重要作用,而且在许多肿瘤的发生、发展过程中也扮演重要的角色。在某些恶性组织中,往往存在M-CSF与M-CSFR的共表达,提示这一对信号分子以自分泌或旁分泌机制参与肿瘤细胞的增殖分化。本实验的目的:观察M-CSF对肺癌细胞株A549在体外培养时的作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法:利用显微镜观察肺腺癌A549细胞经M-CSF培养后细胞形态学的改变;M-CSF对体外培养肺腺癌A549细胞的生长抑制作用采用MTT检测法;用流式细胞术检测细胞DNA含量的变化,分析M-CSF对细胞周期的影响;采用RT-PCR检测M-CSF受体mRNA表达的变化。结果:1.经M-CSF培养后肺腺癌A549细胞变圆,贴壁能力降低,细胞之间连接变得不紧密;2.M-CSF能显著抑制肺腺癌A549细胞的生长,并且呈浓度、时间依赖关系,在M-CSF浓度为10ng/ml时有最大抑制效应;3.流式细胞检测分析显示M-CSF作用后肺腺癌A549细胞G0/G1期细胞增加;4.RT-PCR显示经M-CSF作用后M-CSF受体的mRNA表达水平有所下降。结论:外源性M-CSF对肺腺癌细胞株A549有抗增殖活性,并且这种效应呈时间-浓度依赖关系。对肺癌细胞A549添加外源性M-CSF培养后,并没有出现明显的凋亡峰,但增加了G0/G1期的细胞比例。这提示M-CSF的抗增殖作用并不是诱导细胞凋亡,可能涉及细胞周期的调整。我们的研究表明当M-CSF发挥抑制作用的时候,M-CSFR mRNA的表达有所下降,这提示了M-CSF的抑制作用可能是通过干扰了肿瘤细胞的自分泌机制而发挥的。