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目的:光动力疗法（Photodynamic Therapy, PDT）是借助某种特定的药物（称为光敏剂）进入患者体内后，富集于生长异常的组织（如肿瘤），光敏剂经一定波长光的辐照后发生光动力敏化反应而产生活性氧(reactive oxygen species，ROS)，导致生物大分子光氧化失活，并由此造成细胞损伤以达到破坏目标病变组织的目的。我们通过本实验评估PDT对喉癌HEp-2细胞迁移与侵袭的影响，探讨PDT诱导的ROS在抑制喉癌HEp-2细胞迁移与侵袭中的作用机制。 方法:不同浓度的光敏剂9-羟基脱镁叶绿酸甲酯α(9-hydroxypheophorbideα，9-HPbD)与HEp-2细胞共培养6小时，随之以激光照射15分钟(波长664nm，能量密度2.0J/cm2)，培养24小时后，MTT法测定Hep-2细胞的活性，确定亚致死剂量。利用还原型谷胱甘肽(GSH)抑制ROS的产生，将HEp-2细胞分为4组:正常对照组（无光动力疗法干预，无GSH干预）、光动力组（有光动力疗法干预，无GSH干预）、GSH组（无光动力疗法干预，有GSH干预）、光动力加GSH组（有光动力疗法干预，有GSH干预）。H2DCFDA探针检测细胞内活性氧水平;划痕试验、transwell小室侵袭试验检测亚致死剂量光动力疗法处理24h后HEp-2细胞的迁移与侵袭能力;Westernblotting对比分析MEK1/2和ERK1/2的磷酸化水平及MMP-2和MMP-9的表达情况。 结果:9-HPbD介导的PDT对人喉癌HEp-2细胞具有明显杀伤效应，且与药物浓度有关。PDT诱导喉癌HEp-2细胞产生ROS，而GSH抑制PDT介导的ROS的产生。细胞划痕试验、transwell小室迁移和侵袭试验显示PDT抑制喉癌HEp-2细胞的迁移与侵袭能力，而GSH使PDT抑制喉癌HEp-2细胞的迁移与侵袭的能力下降。Western显示光动力抑制喉癌HEp-2细胞中MEK1/2和ERK1/2的磷酸化，下调喉癌HEp-2细胞MMP-2和MMP-9的表达，而GSH可以逆转这一结果。 结论:光动力产生的ROS抑制MEK1/2和ERK1/2的磷酸化，下调MMP-2和MMP-9的表达，进而抑制喉癌HEp-2细胞的迁移与侵袭。