目的研究重组腺病毒介导HPV16E7基因转染对人宫颈癌Hela细胞周期蛋白cdc25A和CyclinE的影响。方法从宫颈癌标本中经PCR扩增回收HPV16E7基因片段，并将其插入含有绿色荧光蛋白报告基因（GFP）的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV，在E.coliB J5183感受态细菌内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组，构建重组腺病毒基因组Ad-E7。用脂质体介导线性化的Ad-E7转染入包装细胞HEK-293细胞，包装表达E7基因的完整腺病毒颗粒。收集腺病毒上清并在HEK-293细胞扩增腺病毒上清滴度。取第4代病毒上清感染体外培养的人宫颈癌Hela细胞。采用RT-PCR检测转染前后Hela细胞cdc25A mRNA表达的差异；采用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）方法检测转染前后细胞周期蛋白E（CyclinE）表达的差异。结果荧光显微镜下转染后HEK-293细胞和HeLa细胞绿色荧光蛋白表达。在HEK-293细胞中可以收获高感染效率的腺病毒，第四代病毒滴度高达3×10¹¹pfu／ml。RT-PCR结果显示转染后HeLa细胞cdc25A的mRNA含量较转染前显著增加（感染前灰度值0.2306±0.0964，感染后0.8739±0.2188，P＜0.01）。LSCM检测结果显示感染后CyclinE表达较感染前明显增加。结论HPV 16 E7基因可以使用pAdEasy系统在HEK-293细胞和人宫颈癌细胞Hela细胞中高效表达。HPV 16 E7可促进细胞周期转录因子cdc25A的转录，cdc25A过度表达可能是宫颈癌发病机制中的重要分子事件。HPV E7蛋白可通过促进细胞周期素Cyclin E的表达干扰细胞周期，对肿瘤细胞起到促进增殖的作用。