穿心莲内酯对人前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡作用的研究

来源 :辽宁医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dairui1985
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目的观察穿心莲内酯(andrographolide,Andro)在体外对人前列腺癌(Prostatecancer,Pca)DU145细胞增殖、凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法(1)浓度为5.0μmol/L的穿心莲内酯药物作用于DU145细胞24小时后,在倒置显微镜下观察细胞形态的变化;(2)采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测不同浓度穿心莲内酯处理DU145细胞24、48、72小时后对DU145细胞的增殖抑制作用,并求出IC50的值;(3)碘化丙啶(PI)单染后流式细胞术进行不同浓度穿心莲内酯作用于DU145细胞24小时后的细胞周期分析;(4)流式细胞仪观察AnnexinV-FITC/PI双染后细胞凋亡情况;(5)采用免疫印迹法检测凋亡相关蛋白NF-κB、Bcl-2及Caspase-3的表达情况。结果(1)药物作用24小时后,与未作用组相比,可以观察到典型的细胞凋亡形态:细胞间开始失去连接,细胞破碎失去正常梭型形态,细胞变圆、体积缩小,细胞数量明显减少;(2)穿心莲内酯对DU145细胞的抑制作用具有时间和浓度依赖性,24,48和72小时的IC50分别为(51.41±4.13)、(18.74±2.29)和(9.73±2.35)μmol/L;(3)流式细胞仪检测细胞周期结果显示,随着药物浓度的增加,G0/G1期细胞数量增加,S期细胞数量减少,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);(4)经3个不同浓度药物作用24h后,各组的凋亡率分别为(8.39±0.76)%、(31.37±1.75)%及(36.41±1.31)%,与对照组凋亡率(1.87±0.21)%比较差异有统计学意义(P<0.05);(5)免疫印迹结果显示,穿心莲内酯能够抑制NF-κB、Bcl-2蛋白的表达,促进Caspase-3蛋白的表达,且各浓度组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论穿心莲内酯可以在体外使细胞周期阻滞在G0/G1期而抑制DU145细胞的增殖;穿心莲内酯可以促进前列腺癌DU145细胞的凋亡,其作用机制可能与下调NF-κB、Bcl-2蛋白的表达,活化Caspase-3蛋白的表达有关联。
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