基于膜技术汞离子快速检测新方法建立

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汞离子广泛存在于自然界,是环境中毒性最强的重金属元素之一,影响食品和环境安全,危害人体健康。通常汞离子检测依赖大型仪器,耗时长且价格昂贵,难以满足大量、快速检测的需求,大大限制了它们在实际检测中的应用。为了实现汞离子方便快速的现场检测,本文研发了基于膜技术的两种汞离子检测方法,增敏型核酸层析试纸条法和核酸阵列法。(1)增敏型核酸层析试纸条法增敏型核酸层析纸条法是一种直接的超灵敏的现场检测方法。基于T-Hg2+-T特定的识别系统,以金纳米粒子(AuNPs)作为显色标记物,检测Hg2+。信号增敏是指将金纳米粒子用两条互补的寡核苷酸探针分别标记,以增强检测线的信号强度。两条探针的存在使传感信号得到放大,由此可以快速和灵敏的检测Hg2+其肉眼视觉观察和软件定量分析检测Hg2+的检测限分别为0.005 ppb和0.0015 ppb。传统型核酸层析试纸条肉眼可观测的检测限仅为0.2 ppb,相比于传统型核酸层析试纸条,增敏型核酸层析试纸条灵敏度提高了40倍。同时本方法成功应用于实际水样中Hg2+的检测。(2)核酸阵列法基于膜技术核酸阵列法检测汞离子的方法,实验设计了两条富T的寡核苷酸探针,其中一条作为捕获探针以阵列的形式固定在硝酸纤维素膜(NC膜)上,另外一条通过Au-S键偶联在金纳米粒子上,当检测汞离子时,两条富T的探针,通过形成T-Hg2+-T结构,使两条DNA探针杂交,将金纳米粒子捕捉在NC膜上,显色,肉眼观测检测限仅为0.5 ppb。然后,利用金纳米粒子的表面催化效应,银染法使信号增强,此时的检测限有500倍的提高,肉眼观测的检测限到达0.001 ppb。
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