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目的:探讨非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者CD4+T细胞、癌组织细胞EFEMP1的表达下调与DNA高甲基化的分子机制。方法:1.用逆转录-实时定量聚合酶反应(Reverse transcription-quantitative PCR,QRT-PCR)检测NSCLC患者、正常人外周血CD4+T细胞炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-8)及EFEMP1 mRNA的水平;流式细胞术检测NSCLC患者和正常人外周血CD4+T细胞EFEMP1的表达。2.用重亚硫酸氢盐测序法(Bisulfite sequencing PCR,BSP)检测NSCLC患者手术中肺癌组织、正常肺组织中EFEMP1启动子区域DNA甲基化状态;用Western blot检测NSCLC患者手术中肺癌组织、正常肺组织细胞EFEMP1蛋白的表达水平。3.对肺癌A549细胞实验组采用5uM/L的5-氮杂胞苷(5-Azacytidine,5-Aza)处理,对照组不处理;72小时后收集细胞,流式细胞术检测A549细胞表达EFEMP1水平;QRT-PCR检测EFEMP1和炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-8)mRNA水平;酶联免疫吸附实验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测A549细胞上清EFEMP1蛋白表达。结果:1.QRT-PCR结果显示:对比25例肺癌患者和25例正常人对照组外周血CD4+T细胞,发现炎性因子TNF-α、IL-6、IL-8的m RNA在肺癌患者中明显高于正常对照组(P<0.05);而肺癌患者EFEMP1mRNA明显低于正常对照组(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示:相对于正常对照组(15.9%),NSCLC患者外周血CD4+T细胞EFEMP1表达水平(1.52%)明显较低。2.BSP结果显示:与NSCLC患者中正常肺组织对照组相比,NSCLC患者肺癌组织细胞EFEMP1启动子区域的DNA甲基化水平显著升高(P<0.05)。Western blot结果显示:EFEMP1蛋白在NSCLC患者实验组中明显低于正常对照组。3.QRT-PCR结果显示:相对于对照组(未予以5-Aza处理),5-Aza处理组肺癌细胞株A549细胞EFEMP1表达水平大于对照组(P<0.05);炎性因子TNF-α、IL-6和IL-8 mRNA表达水平分别小于无处理对照组(P<0.05)。ELISA检测发现5-Aza处理组细胞上清中IFN-γ表达相对对照组较低(P<0.05);而EFEMP1表达在5-Aza处理组中明显高于对照组(P<0.05)。Western blot发现:相对于对照组,5-Aza处理组细胞EFEMP1蛋白表达相对较高。结论:EFEMP1在NSCLC患者CD4+T细胞和肺组织细胞中表达下调可能与EFEMP1启动子DNA高甲基化有关。