【摘 要】
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目的:从红细胞变形性、红细胞的膜流动性、红细胞膜蛋白质表达、红细胞膜ATP酶活性及胞内Na+和Ca2+浓度方面探讨急性低氧对红细胞的损伤以及低氧习服的保护作用。 方法:将健
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
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目的:从红细胞变形性、红细胞的膜流动性、红细胞膜蛋白质表达、红细胞膜ATP酶活性及胞内Na+和Ca2+浓度方面探讨急性低氧对红细胞的损伤以及低氧习服的保护作用。
方法:将健康雄性Wistar大鼠随机分为常氧对照组、急性低氧组和低氧习服组,每组10只。采用低压舱模拟高原低氧环境对大鼠分别进行急性低氧和间断低氧习服,麻醉后心脏采血,分别1.采用F.820全自动血细胞分析仪测定大鼠红细胞血液学指标,采用LG-B.190血细胞变形测试仪测定红细胞变形性;2.采用日立?-4000荧光分光光度计检测代表红细胞膜脂流动性的DPH荧光偏振度,采用U-2001紫外分光光度计测定红细胞膜胆固醇和总磷脂含量,采用薄层色谱分析法测定红细胞膜磷脂成分PC、PS、·PE、SM的含量;3.采用双向电泳建立大鼠红细胞膜蛋白质双向电泳图谱,通过ImageMaster2DElite软件分析寻找出蛋白质差异点,对其进行质谱鉴定。4.采用红细胞膜ATP酶活性测定试剂盒测定红细胞膜ATP酶活性,采用红细胞内Na+和Ca2+浓度测定试剂盒测定红细胞内Na+和Ca2+浓度。
结果:1.急性低氧大鼠红细胞总数、血红蛋白浓度增加,红细胞变形性下降;红细胞膜脂流动性下降,红细胞膜胆固醇含量、总磷脂含量、胆固醇/总磷脂(C/P)比值下降,红细胞膜磷脂各成分含量发生了变化;建立了急性低氧大鼠红细胞膜蛋白质双向电泳图谱,并与常氧大鼠红细胞膜蛋白质双向电泳图谱比较,选取7个蛋白质点,其中4个在急性低氧后表达下降,其余3个表达改变不明显;红细胞Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性下降,红细胞内Na+浓度和Ca2+浓度升高。2.低氧习服大鼠红细胞总数、红细胞比容、血红蛋白浓度更高,红细胞平均体积较急性低氧组和常氧对照组下降,红细胞变形性比急性低氧组提高,接近常氧刈照组水平;红细胞膜脂流动性增强,红细胞膜胆固醇含量、总磷脂含量、胆固醇/总磷脂(C/P)比值升高,红细胞膜磷脂各成分含量发生了变化;建立了低氧习服大鼠红细胞膜蛋白质双向电泳图谱,并与急性低氧大鼠、常氧大鼠红细胞膜蛋白质双向电泳图谱比较,上述7个蛋白质点中4个在低氧习服后表达增加,3个表达下降。蛋白质差异点质谱技术鉴定结果分别为是补体结合蛋白、水通道蛋白、膜攻击复合物抑制因子、脂质移行酶、葡萄糖运载体、氨基磷脂转移酶、依赖ATP的翻转酶。其中脂质移行酶、氨基磷脂转移酶、依赖ATP的翻转酶与红细胞膜磷脂翻转有关;红细胞膜Na+-K+-ATP酶和Ca2+.Mg2+_ATP酶明显升高,红细胞内Na+浓度和Ca2+浓度降低。
结论:1.急性低氧引起红细胞变形性、红细胞膜流动性、红细胞膜蛋白质表达、红细胞膜ATP酶活性及胞内Na+浓度和Ca2+浓度方面相应的损伤;2.经低氧习服后,上述方面的指标有所改善,低氧习服对急性低氧引起红细胞的损伤具有保护作用;3.红细胞膜上的3种蛋白质(脂质移行酶、氨基磷脂转移酶和依赖ATP的翻转酶)在低氧习服引起红细胞变形性增强的机制中可能发挥重要的作用。
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