鸡精液稀释液设计与筛选方法学研究

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 18次 | 上传用户:daitiejian
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迄今为止,国内外虽有不少有关鸡精液稀释液研究的相关报道,但关于精液稀释液设计与筛选方法学的研究尚属缺乏。在这一领域没有一套完整而实用的理论体系,对诸如精液稀释液pH值、渗透压、缓冲能力和配方物质组成进行调控、筛选和评价,如缓冲能力就没有具体参数可供借鉴,也缺乏测定方法等。有鉴于此,本论文拟从方法学的角度,探索鸡精液稀释液设计与筛选方面的指标体系和测定方法,用以指导制备高受精率的鸡精液稀释液,以适应现代养鸡生产的需要。本论文包括三个部分,第一部分是鸡精液稀释液设计与主要液体质量指标的确定、控制与测定研究。对精液稀释液pH值、渗透压和缓冲能力梯度进行理论控制,然后以实际测定结果检验控制的准确性。第二部分是鸡精液稀释液实验室筛选研究——稀释精液体外精子生存质量与形态学观察研究。通过研究不同pH值、渗透压、缓冲能力和溶质种类的稀释液以及保存时间和温度对保存于其中的精子形态和机能的影响,确定最佳稀释液的合理参数。第三部分是鸡稀释精液人工授精应用研究,以稀释精液进行人工授精,以受精率对稀释液及其设计和筛选方法的优劣做出客观的评价。实验结果表明:①pH值的理论控制准确率在98.69%,渗透压准确率在95.9%-99.1%,缓冲指数准确率在97.6%以上。②在2℃-5℃低温条件下,稀释液缓冲指数不影响精子活率,但影响精子畸形率。缓冲指数348时,精子畸形率极显著地低于缓冲指数119.6~228.8和461.6~1147.6范围的畸形率。为了保持精子正常的形态,不但要求要有合适的pH值和渗透压,同时还要求有适中的缓冲指数。稀释液缓冲指数对精子畸形率的影响较精子活率的影响大。③柠檬酸钠、葡萄糖对鸡精液的保存,具有重要作用,而氯化钾在鸡精液稀释液中并不是必需的;复方稀释液保存效果普遍优于单方稀释液;低温下鸡精液稀释液渗透压应为等渗或接近等渗,且最适渗透压还与构成稀释液的物质种类和相互配比有关系;稀释液PH值应接近中性,最好与精液pH值保持一致;在缓冲指数为3.894-7.257的范围内,缓冲指数与精子保存效果的两个指标均呈现显著的负相关关系。④精子最高生存指数出现在三种有机盐的稀释液中;两种无机盐液中精子存活时间最长,但精子畸形率很高;渗透压值与精子头部畸形类型高度相关(p<0.01),与精子头部弯曲且膨胀百分数的相关系数为-0.93,与精子头部单纯弯曲百分数的相关系数为0.94。在300mmol/L时,精子生存指数、存活时间均较好;500mmol/L时精子畸形率最低;渗透压对保存效果有极显著的影响,物质种类对保存48h精子形态有显著地影响,且渗透压与精子畸形类型有一
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