RASSF1A基因启动子甲基化抑制RASSF1A蛋白表达影响肾细胞癌发生发展的研究

来源 :复旦大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:fangaocang
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第一部分肾细胞癌中RASSF1A蛋白表达与临床病理的关系及其对预后的影响目的探讨我国肾癌患者RASSF1A蛋白表达的基本情况,为进一步深入研究RASSF1A基因启动子甲基化提供研究基础。方法应用免疫组织化学染色技术对肾癌患者癌组织和癌旁组织中RASSF1A蛋白的表达水平进行对比评价,并探索肾癌患者癌组织中RASSF1A蛋白表达水平与年龄、性别、病理类型、病理分期、细胞分化等病理资料之间的相关性,研究癌组织中RASSF1A蛋白表达水平对患者生存率的影响。结果我国肾癌患者RASSF1A蛋白在癌组织中的表达明显低于癌旁正常组织,且RASSF1A蛋白在癌组织中的表达水平与患者的病理分期、细胞分级等因素相关,并直接影响患者术后的生存率。结论肾癌中RASSF1A蛋白表达明显降低。第二部分肾细胞癌中RASSF1A基因启动子甲基化的基本情况及其临床意义目的研究我国肾癌患者RASSF1A基因启动子甲基化的基本情况。方法利用甲基化特异性PCR的方法对比研究肾癌组织和癌旁正常对照组织中RASSF1A基因启动子甲基化频率的差别,并分析影响癌组织RASSF1A基因启动子甲基化频率的病理因素。结果肾癌中RASSF1A基因启动子甲基化频率明显升高,且与患者的病理类型、肿瘤局部进展情况、病理分期以及肿瘤分化程度明显相关。结论结合RASSF1A蛋白在肾癌中的表达变化,推测在肾癌中RASSF1A基因启动子异常甲基化导致基因转录不能,最终引起RASSF1A蛋白表达下降。第三部分肾细胞癌RASSF1A基因启动子甲基化谱式特点目的研究不同病理类型、不同病理分期、不同细胞分级的肾细胞癌中RASSF1A基因启动子500bp范围内的甲基化谱式特点。方法选取不同病理类型、不同病理分期、不同细胞分化的肾细胞癌患者,利用硫化测序PCR的方法对比研究RASSF1A基因启动子区域的甲基化位点和甲基化频率。结果在癌旁正常组织中RASSF1A基因启动子也呈现出一定程度的甲基化,在肾透明细胞癌中肿瘤分期越高、细胞分化越差,RASSF1A基因启动子甲基化位点越多且频率越高。结论RASSF1A基因启动子甲基化是肾癌发生发展过程中的早期事件,并且这是一个伴随着肿瘤进展和恶化而不断变化的动态过程。
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