氨基多糖纳米微粒对肺癌荷瘤裸鼠TNF-α、IL-1βmRNA表达的影响

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恶性肿瘤是严重威胁人类健康的疾病。肿瘤细胞逃避机体免疫系统的监视并不断生长繁殖、浸润和转移最终导致患者死亡。在肿瘤免疫学中发挥抗肿瘤免疫效应的肿瘤坏死因子-α对肿瘤细胞具有细胞毒性,且可诱导产生多型白细胞介素和干扰素;白细胞介素-1β则直接参与某些抗肿瘤生理过程。因此本试验选此二种细胞因子为对象研究氨基多糖纳米微粒的抗肿瘤作用。  前期研究发现氨基多糖纳米微粒(Chitosan nanoparticle,CNP)具有杀菌、抗肿瘤活性,为了揭示CNP对动物非特异性免疫系统的作用效果及其机理,本实验选取75只雄性裸鼠,将肺腺癌细胞SPC-A-1制成为1×107个/mL的细胞悬液,每只0.2mL接种于裸鼠右前腋皮下,建立裸鼠肺癌动物模型。将模型裸鼠随机分为5组,每组15只。根据不同给药剂量分为对照组(生理盐水0.6mL/只)、三个CNP试验组(CNPⅠ组(30mg/kg.w)、CNPⅡ组(60mg/kg.w)、CNPⅢ组(90mg/kg.w))、顺铂试验组(0.75mg/kg.w),除顺铂组为尾静脉注射外,其余各组均为灌胃给药。采用细胞因子活性测定;半定量RT-PCR分析方法,分析研究了CNPⅠ组、CNPⅡ组及CNPⅢ组对肺癌荷瘤裸鼠血清中细胞因子TNF-α、IL-1β活性的影响及对肺癌荷瘤裸鼠脾脏中细胞因子TNF-α、IL-1βmRNA表达的影响,并探讨其作用机理。主要研究结果如下:  移植瘤裸鼠试验显示:CNPⅠ组、CNPⅡ组、CNPⅢ组及顺铂组均能有效抑制SPC-A-1细胞在裸鼠体内的增殖,其抑瘤率分别为43.92%、61.70%、47.46%及65.98%。酶活性测定表明:CNPⅠ组、CNPⅡ组、CNPⅢ组和顺铂组均能促进TNF-α的分泌,分别约为对照组的1.33、1.76、1.40和1.14倍;CNPⅠ组、CNPⅡ组、CNPⅢ组和顺铂组均能促进IL-1β的分泌,分别约为对照组的1.15、2.09、1.29和1.07倍。mRNA表达检测表明:CNPⅠ组、CNPⅡ组、CNPⅢ组和顺铂组均能促进TNF-α基因的表达,分别约为对照组的1.90、3.63、2.09和1.84倍;CNPⅠ组、CNPⅡ组、CNPⅢ组和顺铂组均能促进IL-1β基因的表达,分别约为对照组的2.36、3.63、3.20和2.40倍。  综上所述,CNP对肺癌荷瘤裸鼠移植瘤有抑制作用,在各组中以 CNPⅡ组(60mg/kg.w)的作用最为明显。CNP对肺癌荷瘤裸鼠移植瘤的抑制作用机理为:通过对机体非特异性免疫器官的刺激,上调抗肿瘤相关细胞因子TNF-α、IL-1β的mRNA的表达,使得其在血清中的含量和活性都有所提高,通过TNF-α、IL-1β来杀伤癌细胞,使肿瘤组织发生坏死。
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