蕨黄酮类化合物的提取及其抗兔动脉粥样硬化机理的研究

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目前,蕨的研究主要集中在蕨与生态环境的关系、营养成分分析和加工包装工艺的改进上,对蕨黄酮生物药理活性的研究还很少,在动脉粥样硬化中的应用报道罕见。本研究首先在单因素的基础上,利用FOSS SoxtecTM2055通过正交试验法优化出蕨菜总黄酮提取工艺,并与直接回流提取和索氏回流提取方法相比较,确定蕨黄酮的最佳提取工艺;然后采用双盲随机设计试验,高脂饮食诱导复制AS模型,观察蕨黄酮对动脉粥样硬化的影响,探明其抗AS作用机理。将80只健康、100日龄日本大耳白兔按照血脂水平,随机分成正常对照组、模型对照组、黄酮Ⅰ组、黄酮Ⅱ组、辛伐他汀组5组,于实验末称量其体重和器官重量,检测血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、GLU、ATP、ALP、CK、NO、OX-LDL水平并计算致动脉粥样硬化指数,进行苏丹Ⅲ大体标本染色观察主动脉的AS斑块面积变化,HE染色观察主动脉组织形态学病理变化,并利用图像分析软件计算实验兔主动脉内膜、中膜厚度及动脉粥样斑块面积百分比。结果表明:利用FOSS SoxtecTM2055正交优化工艺提取蕨菜的黄酮得率远远高于直接回流和索氏回流,是直接回流的2.78倍,索氏回流的2.25倍,确定蕨菜总黄酮最佳提取工艺为:乙醇体积分数60%、沸腾时间2.0h、淋洗时间1.0h、料液比1∶30(W/V),且蕨叶片黄酮得率高达8.8%。蕨黄酮处理组饮食、精神状态优于模型对照组,血清TC、TG、LDL-C、AI、ALT、OX-LDL水平明显低于模型对照组(P<0.05),而NO和CK水平升高(P<0.05),葡萄糖水平无明显差异(P>0.05),且主动脉大体标本AS病变程度明显减轻,高剂量蕨黄酮处理组AS斑块面积比模型组降低53.3%;HE染色镜检,蕨黄酮处理组内膜厚度明显降低,且形态学组织病理有明显改善,高剂量组与辛伐他汀处理组疗效相当,且蕨黄酮抗AS作用具有剂量效应。研究证实,最佳工艺大大提高了蕨菜总黄酮的提取效率,且蕨黄酮具有降血脂、抗氧化活性,可用以防治动脉粥样硬化,为动脉粥样硬化的预防和治疗提供新的科学依据。
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