灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.来源于忍冬科,为中药材山银花主要来源之一,上世纪发现并进行广泛引种栽培的自然突变无性系湘蕾灰毡毛忍冬品种相对常规品种具有花蕾期长,花冠不展开,花蕾簇生、整齐、颜色均一,可一次性采摘等诸多优良性状,为了探索湘蕾品种具有明显的开花差异的原因,共从以下几个方面进行研究,并获得了相应的研究结果,为最终从分子水平找出开花差异的根本原因奠定了坚实的基础。主要研究内容与结果如下:1、通过气相色谱法测定了灰毡毛忍冬两个品种花蕾内源激素乙烯生成速率的动态变化。结果显示在整个开花过程中,常规品种内源乙烯生成速率一直高于湘蕾品种,尤其花期后期前者生成速率显著升高。2、分别采用SDS法、改良CTAB法、普通试剂盒法、多糖多酚试剂盒法、改良的多糖多酚试剂盒法提取灰毡毛忍冬花蕾总RNA,采用紫外及琼脂糖凝胶电泳方法进行RNA纯度及完整性的检测。综合纯度和完整性检测结果分析得出,改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良的多糖多酚试剂盒法提取RNA样品,基本能满足克隆及测序等相关后续实验;其中以改良多糖多酚试剂盒法提取的总RNA质量最高,为最适合灰毡毛忍冬花蕾总RNA提取的方法。3、将提取的高质量总RNA进行高通量序列测定,通过Illumina Hiseq2000平台测序,总计产出9597839040nt数据。获得总Unigene基因67222个,总长53645869nt,平均长798nt,两个品种表达量具有明显差异的Unigene基因共20709条,其中灰毡毛忍冬湘蕾品种相对于常规品种表达量为上调的有11779条,表达量下调的有8930条。具有明显差异的基因中,ACS调控相关家族基因6条,ACO调控相关家族基因共8条,属于MADS-box基因家族基因30条。