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背景和目的
Wnt/β-catenin信号通路活化能促进包括乳腺癌转移在内的多种肿瘤过程。然而,Wnt/β-catenin途径在乳腺癌转移中激活的潜在机制有待阐明。抑制Wnt抑制因子对于Wnt/β-catenin信号传导激活有重要作用,微小核糖核酸(microRNAs,miRNA)对这些抑制因子的转录后调节是信号激活的可能潜在机制。本研究的目的是探讨Wnt/β-catenin通路的调节因子如何在乳腺癌转移中发挥作用及其作用机制。
方法
使用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Real-timeQuantitativepolymerasechainreaction,qPCR)分析miR-454-3p表达。采用免疫组织化学法检测人乳腺癌标本中RPRD1A的表达及其与多种临床病理特征之间的关系。低表达和高表达RPRD1A或miR-454-3p用于检测其在乳腺癌细胞中功能潜在的机制。使用异体移植肿瘤模型,三维培养,细胞迁移和侵袭测定以及囊球培养确定RPRD1A和miR-454-3p在乳腺癌中的生物学功能。采用电泳迁移率变动分析(Electrophoreticmobilityshiftassay,EMSA)和荧光素酶报告分析研究RPRD1A和miR-454-3p表达调控和潜在机制及其与乳腺癌中Wnt/β-catenin通路的相关性。
结果
Wnt/β-catenin信号通路抑制因子RPRD1A表达在乳腺癌中下调,其上游调节因子miR-454-3p在转移性乳腺癌中被扩增和过表达,RPRD1A和miR-454-3p均与乳腺癌患者的总生存期和无复发生存期相关。发现miR-454-3p通过抑制RPRD1A,激活Wnt/β-catenin信号传导,从而促进转移。同时,Wnt/β-catenin途径的其他三种负调节因子轴抑制蛋白(axisinhibitionprotein,AXIN)2,dickkopfWNT信号通路抑制剂(dickkopfWNTsignalingpathwayinhibitor,DKK)3和分泌型卷曲相关蛋白(secretedfrizzledrelatedprotein,SFRP)1也被发现是miR-454-3p的靶标,并参与信号激活。发现miR-454-3p参与早期转移过程并在体外和体内条件下促进乳腺癌细胞的干性和早期复发。
结论
研究结果表明,miR-454-3p通过抑制Wnt/β-catenin抑制因子RPRD1A以及AXIN2,DKK3和SFRP1,维持Wnt/β-catenin信号的激活,进而促进乳腺癌体内外的侵袭转移过程;因此,miR-454-3p和RPRD1A可能是乳腺癌转移的潜在诊断和治疗靶点。
Wnt/β-catenin信号通路活化能促进包括乳腺癌转移在内的多种肿瘤过程。然而,Wnt/β-catenin途径在乳腺癌转移中激活的潜在机制有待阐明。抑制Wnt抑制因子对于Wnt/β-catenin信号传导激活有重要作用,微小核糖核酸(microRNAs,miRNA)对这些抑制因子的转录后调节是信号激活的可能潜在机制。本研究的目的是探讨Wnt/β-catenin通路的调节因子如何在乳腺癌转移中发挥作用及其作用机制。
方法
使用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Real-timeQuantitativepolymerasechainreaction,qPCR)分析miR-454-3p表达。采用免疫组织化学法检测人乳腺癌标本中RPRD1A的表达及其与多种临床病理特征之间的关系。低表达和高表达RPRD1A或miR-454-3p用于检测其在乳腺癌细胞中功能潜在的机制。使用异体移植肿瘤模型,三维培养,细胞迁移和侵袭测定以及囊球培养确定RPRD1A和miR-454-3p在乳腺癌中的生物学功能。采用电泳迁移率变动分析(Electrophoreticmobilityshiftassay,EMSA)和荧光素酶报告分析研究RPRD1A和miR-454-3p表达调控和潜在机制及其与乳腺癌中Wnt/β-catenin通路的相关性。
结果
Wnt/β-catenin信号通路抑制因子RPRD1A表达在乳腺癌中下调,其上游调节因子miR-454-3p在转移性乳腺癌中被扩增和过表达,RPRD1A和miR-454-3p均与乳腺癌患者的总生存期和无复发生存期相关。发现miR-454-3p通过抑制RPRD1A,激活Wnt/β-catenin信号传导,从而促进转移。同时,Wnt/β-catenin途径的其他三种负调节因子轴抑制蛋白(axisinhibitionprotein,AXIN)2,dickkopfWNT信号通路抑制剂(dickkopfWNTsignalingpathwayinhibitor,DKK)3和分泌型卷曲相关蛋白(secretedfrizzledrelatedprotein,SFRP)1也被发现是miR-454-3p的靶标,并参与信号激活。发现miR-454-3p参与早期转移过程并在体外和体内条件下促进乳腺癌细胞的干性和早期复发。
结论
研究结果表明,miR-454-3p通过抑制Wnt/β-catenin抑制因子RPRD1A以及AXIN2,DKK3和SFRP1,维持Wnt/β-catenin信号的激活,进而促进乳腺癌体内外的侵袭转移过程;因此,miR-454-3p和RPRD1A可能是乳腺癌转移的潜在诊断和治疗靶点。