α—天门冬氨酰二肽酶的定向进化研究

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α-天门冬氨酰二肽酶(α-Aspartyl dipeptidase),能够高度专一地水解N端为L-天门冬氨酸的α-二肽.根据这一特性,可以利用该酶催化二肽甜味剂Aspartame,Alitame和Neotame前体的合成.为了使该酶更适合工业生产应用,我们对其进行了定向进化改造,以提高该酶的酶活和热稳定性.我们对进化酶的二级结构进行了预测,并讨论了这些氨基酸残基变化对酶的结构、活力和热稳定性的影响.在对α-天门冬氨酰二肽酶进行定向进化改造的过程中,我们提出了新的定向进化策略:在双重选择压力下对酶进行定向进化改造.并且对定向进化方法进行了优化,建立了一套高效的筛选方法,提高了定向进化的效率.
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