【摘 要】
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该研究从成人骨髓中分离扩增骨髓间质干细胞,摸索了分离扩增条件及MSC的基本生物学特性,用中药单体定向诱导MSC分化为神经元,研究发现:1.利用Ficoll-paque密度梯度离心从骨髓
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该研究从成人骨髓中分离扩增骨髓间质干细胞,摸索了分离扩增条件及MSC的基本生物学特性,用中药单体定向诱导MSC分化为神经元,研究发现:1.利用Ficoll-paque密度梯度离心从骨髓悬液中分离出单术核细胞,然后接种于含10﹪FCS的L-DMEM培养液中,可以快速高效的分离扩增hMSC;2.hMSC有很强的增殖能力,可在体外大量扩增,体外扩增5代,细胞数为1×10<8>左右,体外扩增10代,细胞数为2×10<10>左右.扩增15代,细胞数为3-4×10<12>左右.随着传代次数的增加和培养时间的延长,hMSC的增殖能力下降;3.流式细胞仪检测hMSC表面标志证实,CD14、CD34、CD45、CD11a、CD86、CD80、CD33、CD38、CD117等表达为阴性,CD29、CD44、CD59、CD90、CD105、CD166表达阳性;4.FGF-2对MSC生长的影响,FGF-2可以显著地提高低密度接种的细胞的生长率.而且对MSC的分化能力基本没有影响.5.采用中药单体隐丹参酮和丹参酮ⅡA定向诱导hMSC分化为神经元样细胞,表达神经元标志物神经元特慢性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF),神经干细胞标志物巢蛋白(Nestin),不表达神经胶质细胞标志物(GFAP).
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