两类滥用药物及其代谢物的免疫毛细管电泳分析方法研究

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滥用药物的检测是一项难度很高但意义十分重大的工作,由于药物种类多,代谢过程复杂,在体液中的含量低,需要确证内源及外源性药物,需要准确定性与定量,因此给检测工作带来了极大的挑战。 检测滥用药物常用的方法为色谱法(GC-MS,HPLC,CE等),但实际样品一般基质复杂,无法直接进样分析,需要对样品进行预处理,这个过程通常操作比较繁杂,因此建立一种快速富集后再分离的联用方法具有很大的意义。本研究工作以多目标免疫亲和富集和毛细管电泳相结合,以两类滥用药物(吗啡类和类固醇激素类)为分析对象,建立了小分子滥用药物的快速筛选后同时分离分析的方法: 1.设计和合成了吗啡3位全抗原,制备了针对吗啡及其结构类似物均有选择性的多目标抗体,制备了高特异保留吗啡类化合物的免疫亲和柱,采用免疫亲和柱对海洛因吸食者的尿液进行纯化富集,洗脱液经毛细管电泳分离检测,建立了同时测定海洛因代谢物的方法。并对亲和柱的柱容量、洗脱条件和再生条件等进行了讨论。 2.将免疫方法与电分析化学方法相结合,研究了吗啡3位多目标抗体与吗啡及其结构类似物的电化学行为。通过电流的变化测得了吗啡、O6-单乙酰吗啡和吗啡-3-葡糖醛酸苷与吗啡多克隆抗体的结合常数和结合个数;同时制备了吗啡抗体修饰的导电膜电极,作为免疫传感器建立了吗啡的定量分析方法。 3.设计和合成了两种不同偶联部位(3位和17位)结合的诺龙全抗原,制备了两种特异性不同的诺龙多克隆抗体。制备了诺龙多目标抗体的免疫亲和柱,该亲和柱能特异性保留诺龙的结构类似物,与胶束电动毛细管色谱技术相结合,建立了同时测定尿样中类固醇激素(诺龙,睾酮和甲基睾酮)的方法。同时将免疫亲和柱与GC/MS联用,建立了快速测定诺龙代谢物(19-NA和19-NE)的方法。
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