实验目的 骨创伤后的再生能力提示有能够自我复制并能多向分化的干细胞存在。一般认为,此类干细胞存在于骨、骨膜、骨髓及其他由中胚层发育来的组织中,在出生后仍然有少量干细胞继续存在,在机体损伤时参与组织的修复。组织工程的基础是有功能的细胞,骨组织工程需要大量的成骨细胞。十多年来,国内外学者和临床工作者对各种组织的细胞成骨能力进行了大量的研究。提出了定向性骨祖细胞、诱导性骨祖细胞和基质干细胞的概念。目前,在研究中使用的作为种子细胞的成骨细胞来源有以下几种:骨、软骨、骨外膜、骨髓和骨外组织。 从临床应用来看,理想的骨组织工程种子细胞应具备下列特点:1.取材容易,对机体的损伤小。2.在体外培养过程中具有较强的传代繁殖能力,在较短时间内能够得到较大数量并易定向分化为成骨细胞。3.植入机体后能适应受区的环境并保持成骨活性。目前认为能够符合上述特点的种子细胞只有干细胞。 根据发育阶段,干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞的研究受到论理学方面的困扰,细胞来源等方面的限制,因而成体干细胞的研究便受到人们的高度重视。越来越多的证据表明,骨髓基质干细胞(BMSCs)有多分化潜能,移植入体内后可分化为骨、软骨、肌肉、脂肪、血管内皮、肝脏、神经等多种细胞。能够作为组织工程中不同细胞的来源;在体内正常循环中能够分布于多种组织和器官,可以用于细胞和基因治疗。而且取材、分离培养、扩增以及导人外源基因也相对方便。BMSCs通过抽取自体骨髓得到,对病人造成创伤较少,且无免疫排斥反应。因此,BMSCs在实际应用时将具有潜在的优势。 大多数观点认为:BMSCs的分化与微环境密切相关。可能是不同组织的微环境中含有不同的因子,促进进入不同组织的BMSCs获得靶组织的表