达肝素钠对人卵巢癌细胞SKOV3生长增殖及CyclinD1 mRNA表达的影响

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目的:探讨低分子肝素(达肝素钠)对人卵巢癌细胞SKOV3生长增殖、细胞周期分布的影响及其可能的作用机制。方法:体外培养人卵巢癌细胞SKOV3,光镜下观察不同浓度达肝素钠作用后SKOV3生长形态变化;MTT比色法检测达肝素钠对SKOV3的生长抑制作用;流式细胞仪检测达肝素钠对SKOV3细胞周期分布的影响;半定量RT-PCR检测达肝素钠作用后SKOV3表达CyclinD1 mRNA的量。结果:12.5~200IU/ml达肝素钠作用于SKOV3细胞后,随着药物浓度的增加及作用时间的延长,光镜下可见细胞皱缩、细胞变圆、细胞间连接疏松、部分细胞脱落、甚至细胞破裂等形态学改变;MTT法检测发现12.5~200IU/ml达肝素钠作用于SKOV3细胞24、48小时后,对其生长均有抑制作用,且表现出一定的剂量、时间依赖关系;不同浓度达肝素钠处理后24小时,细胞周期分布发生明显变化,G0/G1期细胞比例逐渐增加,S期细胞比例逐渐减少,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01),而G2/M期细胞比例与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);半定量RT-PCR结果显示,达肝素钠作用24小时后能降低SKOV3细胞CyclinD1 mRNA表达,随着药物浓度的增加其表达量逐渐减少,各实验组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:达肝素钠可抑制卵巢癌细胞SKOV3生长,其机制可能为通过降低CyclinD1 mRNA的表达,使细胞阻滞于G0/G1期。
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