抗肿瘤转移方抗HEP肝癌作用机制研究

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目的:本研究旨在通过建立HEP肝癌荷瘤小鼠模型,以探讨抗肿瘤转移方(简称“抗瘤方”,KLF)抗肿瘤作用机制。方法:建立HEP肝癌荷瘤小鼠模型,观察KLF高、中、低三个剂量组对肿瘤的抑制情况;通过研究各组小鼠生存期,分析KLF对荷瘤小鼠生存期的影响;通过测定脾指数,及外周血的T细胞亚群,分析KLF对荷瘤小鼠免疫功能的影响;通过检测血流变学指标,分析KLF对荷瘤小鼠血流变学的影响;通过检测血管生成相关蛋白VEGF、KDR的表达情况,分析KLF对肿瘤血管生成的影响。结果:1.KLF高、中、低剂量组的抑瘤率分别达34.73%、30.13%、19.65%,有明显的量效关系,其中高剂量组抑瘤率较模型对照组差异显著(P <0.05);2.KLF对荷瘤小鼠生存期有显著延长作用,与模型组比较, KLF高、中剂量组显著延长(P <0.01),低剂量组也有延长作用(P <0.05),其中高剂量组生命延长率最高达31.57%,中位生存期达42.00~+日,而模型对照组仅为33日;3.KLF高剂量组脾指数与5-Fu化疗组比较有差异(P <0.05),KLF中、低剂量组脾指数与5-Fu化疗组比较差异显著(P <0.01),余各组间未见差异。4.正常对照组CD3~+比例较模型对照组和中药高剂量组均有显著差异(P <0.05),中药组CD3~+比例略高于模型组,但无统计学差异;正常组CD4~+比例较模型组有显著差异(P <0.05),但与中药组比较,未见统计学差异,中药组与模型组比较亦无差异;各组CD8~+之间均未见显著差异;在CD4~+/CD8~+比值上,模型组较正常组(P <0.01)和中药组(P <0.05)均有差异,而正常组与中药组比较无显著差异。5.KLF各组全血粘度、血浆粘度、红细胞压积与模型组比较均有显著差异(P <0.05)。6. KLF高剂量组VEGF、KDR阳性组织平均光密度比较模型对照组差异显著(P<0.05),Rg3组比较模型对照组差异显著(P <0.01),KLF高剂量组与Rg3组相比差异显著(P <0.05)。结论:1.KLF各个剂量组对小鼠HEP移植性肝癌均有抑制作用,呈现出剂量依赖效应。2.KLF能够延长荷瘤小鼠生存期,生命延长率与剂量呈正相关。3.KLF对荷瘤小鼠免疫能力有提高作用,KLF各组脾指数较5-Fu组差异显著,可能与化疗药5-Fu对小鼠免疫功能抑制有关,KLF各组脾指数均较模型组高,显示有一定提高免疫功能作用。T细胞亚群检测显示KLF能提升CD3~+、CD4~+比例,降低CD8~+比例,使CD4~+/CD8~+比值上升,提高小鼠免疫能力。4.KLF三个剂量组均能显著改善荷瘤小鼠重要血流变指标,改善血流内环境,从而抑制肿瘤扩增及转移。5.KLF具有一定的抗肿瘤血管生成作用,其机制可能与其抑制HEP肝癌移植瘤中肿瘤细胞或内皮细胞VEGF及其受体KDR的表达有关。
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