【摘 要】
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芽孢杆菌是国家允许使用的饲料微生物菌种,具有稳定性好、抗性强、复活率高等自身优势,已成为一个研究热点。本论文研究了不同的培养基组成和培养条件对枯草芽孢杆菌生长的影
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芽孢杆菌是国家允许使用的饲料微生物菌种,具有稳定性好、抗性强、复活率高等自身优势,已成为一个研究热点。本论文研究了不同的培养基组成和培养条件对枯草芽孢杆菌生长的影响,确定了较好的碳源、氮源、无机盐浓度、温度、pH、溶氧等条件。然后以优化的摇瓶培养条件为基础,对枯草芽孢杆菌进行了10L发酵罐的放大培养。并对发酵液的后处理工艺进行了研究,探讨了离心、过滤以及干燥等工艺过程对活菌数的影响,为饲用芽孢杆菌的工业化生产提供依据。
本论文主要的研究结论如下:
(1)枯草芽孢杆菌摇瓶培养的优化研究
确定了适合的种子培养时间和接种量分别为8h和3%;选择玉米淀粉作为培养基的碳源,通过单因素实验获得了较优的玉米淀粉浓度为20g/L,并对玉米浆的初始浓度进行了优化,得出较优的玉米浆为40g/L。然后对确定的碳氮源进行了正交试验,得到了最高菌体浓度的组合为玉米淀粉15g/L,酵母膏1.5g/L,玉米浆40g/L,NH4Cl3g/L。探讨了无机盐种类对枯草芽孢杆菌生长的影响,得出最适无机盐浓度为0.03%MgSO4·7H2O、0.015%MnSO4·H2O、0.010%CaCl2。
同时对枯草芽孢杆菌的培养条件进行研究,确定了最佳的培养条件:温度37℃,初始pH7.0,摇床转速220rpm。
(2)枯草芽孢杆菌的扩大培养研究
在以上摇瓶优化的基础上,进行了10L发酵罐的放大培养实验,活菌数最大值可达8.08×109cfu/mL,大约是摇瓶培养的5倍,为大规模发酵培养提供了有益借鉴。
(3)枯草芽孢杆菌微生态制剂的研究
适宜的絮凝条件是在发酵液中先后加入0.6%Na2HPO4、1.1%CaCl2,并调pH值为6.5。对发酵液分别进行了过滤处理和离心处理,最终菌泥中的活菌得率分别为87.2%和86.4%。将载体复配后的物料经烘箱低温干燥后,所得产品的活菌数均达到质量要求,其中载体与湿菌体以2:1的比例混合,载体由沸石粉、CaCO3和玉米淀粉以2:1:1的比例进行复配而得到的产品活菌数较高。
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