Twist1基因在食管癌相关成纤维细胞中的作用及临床病理学意义

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目的:检测表达Twist1基因的食管癌相关成纤维细胞条件培养液对食管癌细胞侵袭、迁移能力的影响,进一步探讨在食管鳞癌间质组织中Twist1表达与食管癌临床病理特征及患者生存率之间的关系,为食管癌的基因治疗提供有效靶点,并使之成为预测患者预后的良好指标。方法;从正常食管黏膜分离培养成纤维细胞,用不同浓度IL-6分化成癌相关成纤维细胞后,采用Western-blot和荧光定量RT-PCR检测Twist1的表达情况。通过细胞划痕、Transwell小室侵袭迁移实验,检测表达Twist1的食管癌相关成纤维细胞条件培养液对食管癌细胞侵袭、迁移能力的影响;免疫组化方法检测食管鳞癌间质组织中Twist1的表达,分析其表达与癌相关成纤维细胞标志物及食管癌患者临床病理特征与生存率之间的关系。结果:原代培养的正常食管成纤维细胞用IL-6处理后,Twist1, SMA和FAPα表达水平上调。TE8食管癌细胞株中加入条件培养液后,与对照组(未加条件培养液组或加正常成纤维细胞条件培养液组)相比,划痕愈合速度更快;Transwell小室迁移和侵袭的细胞数明显增加。在食管鳞癌间质组织中Twist1表达与癌相关成纤维细胞标志物FAP、PDGFRα、PDGFRβ、SMA的表达及食管癌T分期、临床分期和淋巴结转移密切相关;食管癌成纤维细胞中Twist1呈阳性组,总生存率和无病生存率显著低于阴性组。结论:1.表达Twist1基因的食管成纤维细胞条件培养液促进食管癌细胞的侵袭和迁移能力。2.食管鳞癌间质组织中Twist1的表达将有助于判定和评估患者的预后。3. Twist1可能作为食管癌相关成纤维细胞标志物,并为食管癌的治疗提供有效的基因靶点。
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