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第一部分：机械预牵张可以抑制过度机械牵张所致肺泡Ⅱ型上皮细胞HMGB 1的表达目的：探讨机械预牵张对过度机械牵张(Cyclic stretch, CS)所致肺泡Ⅱ型上皮细胞晚期炎性介质高迁移率族蛋白1(High mobility group box 1, HMGB 1)表达的影响。方法：本实验以肺泡Ⅱ型上皮细胞株(A549细胞)作为研究对象,采用Flexercell-4000作为细胞周期性机械牵张动力。实验分为6组：对照组(Ⅰ组)：常规培养,未进行机械牵张；机械牵张组(Ⅱ组)：给予A549细胞20% CS6h;15min预牵张组(Ⅲ组)：给予5% CS 15 min后,随后给予20%CS6 h; 30 min预牵张组(Ⅳ组)：给予5%CS 30min后,随后给予20%CS 6h; 60 min预牵张组(Ⅴ组)：给予5%CS 60 min后,随后给予20% CS6h; 120min预牵张组(Ⅵ组)：给予5%CS 120 min后,随后给予20%CS6h。所有细胞均用酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay, ELISA)测定晚期炎性介质HMGB 1表达；RT-PCR法测定HMGB 1 mRNA及IMGB 1受体mRNA表达；Western Blot法测定转录激活因子3 (Signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)磷酸化情况。结果：与Ⅰ组比较,Ⅱ组A549细胞给予20%机械牵张6 h后晚期炎性介质HMGB1表达、HMGB 1 mRNA表达、HMGB1受体nRNA及STAT3磷酸化水平明显增加(P<0.05)。与Ⅱ组比较,机械预牵张30、60、120 min时HMGB1表达、HMGB1 mRNA表达及STAT3磷酸化水平明显明显降低(P<0.05),尤以预处理60 min时效果最优(P<0.05)；HMGB1受体mRNA表达无明显变化(P>0.05)。结论：机械预牵张可以抑制过度机械牵张所致的肺泡II型上皮细胞晚期炎性介质HMGB 1的表达,其机制与抑制STAT3磷酸化有关。第二部分：机械预牵张通过抑制SOCS3/STAT3通路激活减少过度机械牵张所致HMGB1表达目的：探讨细胞因子信号转导抑制蛋白3(Suppressor of cytokine signaling 3, SOCS 3)/STAT 3信号通路在机械预牵张抑制机械牵张所致肺泡II型上皮细胞HMGB1表达中的作用。方法：第一部分：A549细胞分为5组,Con trol组(未转染)；negative组(转染阴性对照siRNA); siRNA-SOCS3-1组(转染siRNA-SOCS3-1); siRNA-SOCS3-2组(转染siRNA-SOCS3-2); siRNA-SOCS3-3组(转siRNA-SOCS3-3)。 RT-PCR法测定HMGB 1 mRNA表达。第二部分：A549细胞分为4组,20% CS组(予以A549细胞20% CS6 h):20% CS+5% CS+SOCS3 siRNA组(SOCS3 siRNA转染后,给予A549细胞5% CS 60 min,随后给予A549细胞20%CS 6h); 20% CS+5% CS组(给予A549细胞5% CS 60 min,随后给予给予A549细胞20%CS 6h); 20% CS+5% CS+negative-siRNA组(]egative-siRNA转染后,给予A549细胞5% CS 60 min,随后给予A549细胞20%CS 6 h)。所有细胞均用ELISA法测定晚期炎性介质HMGB 1表达；RT-PCR法测定HMGB 1 mRNA表达；Western Blot法测定STAT3磷酸化情况。结果：第一部分：与Control组比较,SOCS3 siRNA-1, SOCS3 siRNA-2及 SOCS3 siRNA-3组转染后的SOCS3 mRNA表达量均明显降低(P<0.05)。一其中, SOCS3 siRNA-2组的mRNA表达量最低(P<0.05)。第二部分：与20% CS组比较,5%CS+20% CS组HMGB1表达、HMGB 1 mRNA表达及STAT3磷酸化均明显降低(P<0.05)。与5%CS+20% CS组相比,5%CS+20 % CS+SOCS3 si N组HMGB 1表达、HMGB 1 mRN A表达及STAT3磷酸化均明显增加(P<0.05),5% CS+20% CS+negative-siRNA组HMGB1表达、HMGB 1mRNA表达及STAT3磷酸化均无明显变化(P>0.05)。结论：机械预牵张通过SOCS 3/STAT 3信号通路抑制机械牵张所致HMGB1表达。