本论文旨在研究黄花蒿醇提物对脂多糖（LPS）诱导损伤奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成的影响及作用机制。研究包括4部分内容,首先建立奶牛乳腺上皮细胞健康模型,然后使用LPS诱导建立奶牛乳腺上皮细胞炎症损伤模型,在此基础上,进一步探究黄花蒿醇提物对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成及其作用机制的影响。（1）奶牛乳腺上皮细胞健康模型的构建。采用胰蛋白酶消化及差速贴壁消化法建立奶牛乳腺上皮细胞健康细胞系,经传代、纯化、冻存复苏等步骤得到第3代细胞,采用角蛋白18免疫荧光、MTT法对细胞生理活性进行鉴定和检测。结果表明,第3代细胞活力较强,呈典型的鹅卵石状,且纯度较高,可用于后续试验。（2）LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞炎症损伤模型的构建。采用LPS诱导乳腺上皮细胞建立细胞炎症模型,通过检测细胞活力、细胞凋亡率筛选LPS添加剂量和处理时间。结果提示,奶牛乳腺上皮细胞LPS诱导损伤模型凋亡率应在30%-50%范围内,1μg/m L LPS组和10μg/m L LPS组细胞凋亡率分别为44.6%和43.96%。不同浓度LPS处理9 h和12 h后与对照组相比细胞存活率均显著下降（P<0.05）,但10μg/m L LPS处理12 h后相对于1μg/m L LPS组下降趋势较为明显。因此,10μg/m L LPS诱导处理12h可用于建立理想的乳腺上皮细胞炎症模型。（3）黄花蒿醇提物对LPS诱导的奶牛乳腺细胞乳蛋白合成的影响。试验分组为:对照组:奶牛乳腺上皮细胞用基础培养基常规培养15 h;LPS组:奶牛乳腺上皮细胞先用基础培养基处理3 h后,再用10μg/m L LPS的处理12 h;黄花蒿醇提物+LPS处理组:先用含不同浓度（3μg/m L、6μg/m L、12μg/m L）黄花蒿醇提物的基础培养基处理3 h后,再用10μg/m L LPS的处理12h。检测细胞周期、细胞氨基酸水平、总蛋白、β-酪蛋白、αs1-酪蛋白。试验结果表明,与模型组相比,3μg/m L、6μg/m L和12μg/m L黄花蒿醇提物能提高LPS诱导下奶牛乳腺上皮细胞活力,促进细胞有丝分裂,具备一定预保护作用。3μg/m L黄花蒿处理组天冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Glu）含量显著增高（P<0.05）,丙氨酸Ala含量显著降低（P<0.05）;6μg/m L、12μg/m L黄花蒿醇提物处理组总必需氨基酸（TEAA）、总非必须氨基酸（TNEAA）、各必需氨基酸（EAA）、各非必需氨基酸（NEAA）和总氨基酸浓度显著增高（P<0.05）。这说明黄花蒿醇提物能够显著提高LPS诱导损伤BMECs氨基酸合成水平。与模型组相比,12μg/m L黄花蒿处理组预保护作用显著,总蛋白含量显著增高（P<0.05）,3μg/m L和6μg/m L黄花蒿处理组有增高趋势但不显著（P>0.05）6μg/m L、12μg/m L黄花蒿BMECs中β-酪蛋白含量显著高于模型组,且恢复至与对照组相近水平（P>0.05）;3μg/m L黄花蒿处理组效果不明显（P<0.05）。3μg/m L、6μg/m L、12μg/m L黄花蒿处理组αs1-酪蛋白含量均显著高于模型组（P<0.05）。由此可见,黄花蒿醇提物可能通过提高受损伤BMECs中αs1和β-酪蛋白的含量来使细胞总蛋白浓度恢复正常水平。（4）黄花蒿醇提物对LPS诱导损伤模型乳蛋白合成机制研究。试验分组同上,采用实时荧光定量PCR法检测乳腺上皮细胞内乳蛋白合成的相关基因表达量,并采用ELISA试剂盒检测胞内乳蛋白合成相关蛋白含量。结果表明,相对于模型组,黄花蒿醇提物能显著上调BMECs乳蛋白合成相关基因m TOR、S6K1、JSK2、STAT5、CSN1S1、CSN2、4EBP1、EIF4E的m RNA表达量（P<0.05）。与模型组相比,不同浓度的黄花蒿乙醇提物物均显著增加细胞中m TOR、S6K1蛋白含量（P<0.05）,6μg/m L和12μg/m L黄花蒿醇提物显著增加了4EBP1、JAK2蛋白含量（P<0.05）,12μg/m L黄花蒿醇提物增加了STAT5蛋白含量（P<0.05）。这说明黄花蒿醇提物能上调BMECs乳蛋白合成相关基因表达量,且能一定程度上提高m TOR、S6K1、EIF4E、EIF4EBP1、JAK2和STAT5的蛋白含量。综上所述,黄花蒿醇提物对于LPS诱导炎症损伤模型细胞活力降低有一定的抑制作用,且可能通过m TOR/S6K1/4EBP1信号通路和JAK2/STAT5信号通路上调LPS诱导损伤乳腺细胞乳蛋白合成水平。