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微生物转化法污染较少、能耗较低,与化学法相比较是一种环境友好的合成方法,具有广阔的应用前景。利用该种方法合成的香料被认为是天然、绿色的。肉桂酸是广西丰富的特色林产资源,桂油生产过程中的副产物。本文以肉桂酸为初始底物,开展了微生物Mucor sp.转化肉桂酸生成天然香料苯乙酮及1-苯乙醇的相关研究。并针对不同的微生物转化体系建立了准确可靠、简单快捷的分析方法,为微生物转化过程的监测和调控提供了有效的手段。研究的内容及成果如下:1.建立了测定肉桂酸、肉桂醛、肉桂醇、苯甲醛、苯乙酮的高效液相色谱分析方法,该方法简便快捷、准确可行,为微生物转化肉桂油的快速筛菌及其后续研究奠定基础;采用气相色谱法建立了肉桂酸、苯乙酮和1-苯乙醇三物质准确可靠的分析方法,为Mucor sp.转化肉桂酸生成苯乙酮和1-苯乙醇的研究提供了手段;采用高效液相色谱法建立了苯乙酮和S-(-)-1-苯乙胺简便准确的分析方法,为微生物合成S-(-)-1-苯乙胺奠定基础。2.研究了微生物Mucor sp.降解肉桂酸生成天然苯乙酮的降解途径,为生物转化过程的调控提供理论基础。利用GC-MS首次检测到作为Mucor sp.降解肉桂酸生成苯乙酮的一个中间体p-苯乙醇。并推测了Mucor sp.转化肉桂酸的反应途径:肉桂酸首先在侧链的“C=C”上发生环氧化反应,然后经过脱羧、还原开环得到中间体p-苯乙醇,p-苯乙醇再经过羟基迁移和氧化得到苯乙酮。3.分别以肉桂酸和苯乙酮作为初始底物,Mucor sp.能将它们分别转化为苯乙酮和1-苯乙醇。鉴于此反应特性,本文对以肉桂酸作为初始底物时Mucor sp.将其转化生成苯乙酮和1-苯乙醇的反应进行了研究。研究表明:(1)加入低于2g.L-1浓度的肉桂酸作为初始底物反应时,Mucor sp.能将肉桂酸连续转化生成了1-苯乙醇;(2)加入高于2g.L-1浓度的肉桂酸作为底物反应时,Mucor sp.转化肉桂酸生成苯乙酮后,Mucor sp.受反应体系中肉桂酸和苯乙酮浓度的抑制,不能实现Mucor sp.连续转化肉桂酸生成1-苯乙醇。4.对高浓度的肉桂酸作为初始底物连续转化生成1-苯乙醇的反应进行了研究。结果表明,在以高浓度的肉桂酸作为初始底物反应的后期加入营养液,是一种可行的实现连续转化肉桂酸生成1-苯乙醇的方法。5.对Mucor sp.连续转化肉桂酸生成1-苯乙醇的工艺条件进行了优化。结果表明:100mL装液量于500mL锥形瓶中,2g.L-1肉桂酸作为初始底物,转化2天后,一次性加入50mL灭菌的营养液,并调节反应体系的pH值为6,200r·min-1的转速,继续反应3天,1-苯乙醇得率达到43.33%。