α-synuclein与微管蛋白相互作用及其对微管形成影响的初步研究

被引量 : 0次 | 上传用户:fengjikun
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
α-synuclein蛋白(SNCP)广泛存在于大脑组织中,是一种脂结合的突触前蛋白。越来越多的研究发现α-synuclein是一些神经退行性疾病共同的致病因子,它以聚集纤维的状态在神经元或神经胶质细胞中沉积是这些神经退行性疾病的标志,这些疾病包括帕金森病(Parkinson’s disease,PD)、Lewy小体痴呆、阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)和多系统萎缩症(multiple system atrophy,MSA),它们通称Synucleinopathies。微管是细胞骨架的主要结构,由a/βtubulin异二聚体和许多小的微管相关蛋白组成(MAPs),MAPs对细胞中微管的动力调节和分布起重要的作用,且微管在维持细胞的形态、细胞内物质运输以及细胞的有丝分裂和减数分裂过程中起非常重要的作用。α-synuclein蛋白作为一种功能性的微管相关蛋白,明确它与微管蛋白之间的相互关系,为进一步研究该蛋白的结构和功能以及理解其在神经系统疾病中的作用有着重要意义。在本研究中,我们利用原核表达系统纯化出全长的SNCP,同时从牛脑组织中提取纯化的天然微管蛋白,通过免疫共沉淀、GST pull-down等技术证明全长的SNCP能够在体外与天然的微管蛋白发生分子间的相互作用,并且利用免疫荧光共聚焦显微镜发现二者共定位于细胞中,为证实二者在细胞中的相互作用提供了理论依据;为了进一步明确SNCP与微管蛋白发生相互作用的区域,我们构建并表达了SNCP的缺失突变体SNCP1-60、SNCP60-100、SNCP31-100和SNCP1-100,通过免疫共沉淀、GST-pull down等技术研究它们与天然微管蛋白的相互作用,研究发现SNCP60-100、SNCP31-100和SNCP1-100能够与微管蛋白之间发生分子间的相互作用,而SNCP1-60与微管蛋白之间则不存在相互作用,初步确定SNCP与微管蛋白的相互作用位点位于SNCP60-100 aa,但不排除SNCP60-100 aa也有作用位点存在。在证实SNCP与微管蛋白间存在体外的分子间相互作用并确定二者相互作用区域的基础上,我们进一步利用体外微管聚集实验和共沉淀实验检测SNCP与tubulin的相互作用是否对微管的聚合产生影响。结果显示,全长的SNCP能够影响微管蛋白的聚合,而N端的SNCP1-60对微管蛋白的聚合影响不明显,SNCP60-100、SNCP31-100和SNCP1-100与全长的SNCP同样,能够对微管蛋白的聚合造成影响。提示SNCP蛋白能够影响微管蛋白的聚合,且对微管蛋白的聚合造成影响的序列主要位于60位氨基酸之后的区域。
其他文献
在经济市场化和全球化的大环境下,文化贸易成为当代经济发展的一只独立力量,对全球经济发展起到了重要作用。影视产品是一种特殊的文化产品,不仅具有商业价值,更具有独特的文
选择重读《朝花夕拾》,源于跟一位初三学生的聊天。她尽管已在初一读过《朝花夕拾》,但对这本书的印象已完全模糊,只记得鲁迅在书中抨击了封建制度。我不禁有些怅惘,一部经典
粮食是民生之本,粮食安全问题不仅是社会问题更是政治问题。粮食价格作为百价之基,长期以来为社会各界广泛关注。随着我国粮食市场的发展以及开放程度的逐步提高,影响粮食价
2013年~2015年,利用问卷法和观察法,收集了公众对成都动物园解说及其具体内容的需求、参与的感受及解说员培训方法、培训效果和解说难点等数据。100%的公众希望动物园开展解
土地是人类生存与发展不可或缺的基础资源与财富源泉。科学有效的土地利用区划是区域土地资源高效、持续利用的重要保障,对于统筹区域协调发展具有指导性作用,同样,也是区域
随着基础教育课程改革在全国的广泛推进,小学科学课程资源的开发与利用这一现实问题日益突出。本研究以内蒙乌海市海勃湾区小学为研究对象,对其在科学课程资源开发与利用过程
苹果公司,一直以来以其产品开发团队闻名,该团队把来自工程、设计、市场等不同部门的员工集合在一起。$$当公司在对战略进行管理时,是否会影响团队的效率?高管制定的团队管理方法
报纸
本论文主要基于北京市海淀区1999年,2006年,2013年三期Landsat7遥感数据,采用面向对象的方法分类,综合使用景观指数及Logistic-CA-Markov模型,对北京市海淀区近二十年的土地
本文以玫瑰(Rosa rugosa)种子为研究对象,通过种皮透水性的测定、种皮和种胚浸提液的生物测定、种子休眠解除过程中内源激素含量、营养物质含量、POD活性的测定,探讨玫瑰种子
学习英语,在学习语言的同时,掌握其称呼的规则也是十分重要的.对不同年龄、不同身份的人在不同的场合应采用适当的称呼.