Hedgehog信号通路成员表达与鼻咽癌淋巴管新生及淋巴结转移的关系

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目的:探讨鼻咽癌组织中Hedgehog信号通路成员Shh、Ptch1、Smo和Gli-1蛋白表达与淋巴管新生及患者临床病理特征、淋巴结转移的关系。方法:应用Shh兔抗人单克隆抗体、Ptch1兔抗人多克隆抗体、Smo兔抗人多克隆抗体、Gli-1兔抗人单克隆抗体基于免疫组织化学技术检测69例鼻咽癌组织及15例正常鼻咽上皮组织中Shh、Ptch1、Smo、Gli-1蛋白表达;以免疫反应评分体系(Immuno-Reactive-Score,IRS)评价上述蛋白的表达水平将IRS0~6分为低表达,7~12分为高表达;应用D2-40鼠抗人单克隆抗体对鼻咽上皮组织的淋巴管内皮细胞染色,以计数淋巴管密度(LVD)。应用SPSS18.0统计学软件包对实验数据进行分析,蛋白免疫反应评分均值的比较应用t检验;蛋白表达水平高低的比较采用χ2检验或Fisher’s Ex act检验;计量资料的相关性比较采用Spearman等级相关分析。以P<0.05判定为差异具有统计学意义。结果:Shh、Ptch1、Smo蛋白主要表达在胞膜和胞质;Gli-1蛋白以胞质或胞核表达为主,主要表达在癌细胞的胞核。69例鼻咽癌对Shh、Ptch1、Smo、Gli-1蛋白表达的综合评分别为6.59±3.66、4.77±3.52、6.39±3.55及6.26±3.91,分别高于15例正常鼻咽上皮的3.20±1.82(P=0.001)、2.53±2.00(P=0.020)、3.00±1.65(P=0.001)和2.73±2.02(P=0.001)。按上述蛋白低表达(0~6分)、高表达(7~12分)进行分组,鼻咽癌组织中Shh、Ptch1、Smo、Gli-1表达水平均高于鼻咽上皮(P<0.05)。Shh表达与肿瘤临床分期、是否存在淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤浸润深度、是否远处转移无关;Gli-1表达与肿瘤是否存在淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤浸润深度、是否远处转移无关;Ptch1、Smo蛋白表达与临床病理特征无关(P>0.05)。鼻咽癌组织LVD显著高于正常鼻咽上皮(P<0.05),且鼻咽癌组织Shh、Gli-1表达与LVD呈正相关(r分别为0.382,0.464,P=0.001,P<0.001)。而Ptch1、Smo与LVD的关系无统计学意义(r分别为0.088,0.124,P分别为0.472,0.311)。鼻咽癌组织Shh与Ptch1、Gli-1表达水平均呈显著正相关(分别为r=0.456,0.452,均为P<0.001);Gli-1与Ptch1、Gli-1及Smo表达呈显著正相关关系(分别为r=0.409,0.383,均为P<0.001);Smo与Shh、Ptch1表达无相关性(r分别为0.179,0.089,P分别为0.141,0.468)。结论:Hedgehog信号通路组成蛋白Shh、Ptch1、Smo、Gli-1在鼻咽癌中过度表达,提示该通路在鼻咽癌存在异常激活;该信号通路异常激活可参与调控肿瘤淋巴管新生和促进淋巴结转移,以Hh信号通路为靶点治疗鼻咽癌可能成为新的方向。
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