论文部分内容阅读
嵌合抗原受体修饰T淋巴细胞(Chimeric antigen receptor modified T lymphocyte,CAR-T)疗法在血液系统恶性肿瘤中已取得了突破性进展,然而,CAR-T在实体瘤治疗中仍面临巨大挑战,其主要原因是由于实体肿瘤存在的异质性以及肿瘤抑制性免疫微环境抑制了CAR-T的存活以及免疫杀伤活性。本研究在靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(Glypican-3,GPC3)的二代GPC3-28Z T细胞的基础上基因编辑T细胞使其可诱导表达IL-12(GPC3-28Z-NFAT-IL12 T细胞),其优势在于GPC3-28Z-NFAT-IL12 T细胞仅在肿瘤局部被激活后释放白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12),既可增强CAR-T细胞的抗肿瘤作用,又可以降低IL-12系统性毒副作用,并在免疫缺陷小鼠和免疫健全小鼠中同时展开探究。体外研究发现,GPC3-28Z-NFAT-IL12 T细胞与二代GPC3-28Z T细胞均可有效且特异杀伤GPC3阳性肿瘤细胞,但GPC3-28Z-NFAT-IL12 T细胞相对于二代GPC3-28Z T细胞可分泌更多与抗肿瘤相关的细胞因子;体内实验中,在免疫缺陷小鼠模型,GPC3-28Z-NFAT-IL12 T细胞面对大负荷肿瘤时能够发挥更强大的抗肿瘤效果,主要与IL-12增加了IFN-γ的分泌,促进T细胞浸润到实体瘤以及延长CAR-T存活有关;在对免疫健全荷瘤小鼠治疗后发现,在不清淋条件下,低剂量GPC3-m28Z-m NFAT-m IL12 T细胞抗肿瘤效果仍强于高剂量GPC3-m28Z T细胞组,除能促进T细胞浸润肿瘤以外,IL-12还可抑制肿瘤微环境中的免疫抑制细胞,如下调调节性T细胞,进而增强抗肿瘤效果,重要的是两种小鼠模型中均未发现IL-12相关的毒副作用。综上,在免疫缺陷小鼠和免疫健全小鼠模型中,诱导表达IL-12能够增强CAR-T疗效,而未产生明显毒副反应;并且该疗法可在不清林条件下发挥抗肿瘤作用,有望为GPC3-CAR-T的临床应用提供一种新的策略。