【摘 要】
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熊果酸(Ursolic acid,UA)为一种五环三萜,归属C30类异戊二烯化合物,普遍分布在草药、叶子、花和果实中。近年来,由于它们的各种活性和低毒性,成为研究的热点。研究证实,熊果酸具备许多药理作用,如安定、抑制炎症、防癌、治疗慢性溃疡、抑制HIV、心脏血管保护、神经保护和增强机体免疫功能等功效。由于植物样品的复杂基质以及具有一些结构和极性相似的物质,熊果酸的提取和纯化困难,因此,样品预处理是
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熊果酸(Ursolic acid,UA)为一种五环三萜,归属C30类异戊二烯化合物,普遍分布在草药、叶子、花和果实中。近年来,由于它们的各种活性和低毒性,成为研究的热点。研究证实,熊果酸具备许多药理作用,如安定、抑制炎症、防癌、治疗慢性溃疡、抑制HIV、心脏血管保护、神经保护和增强机体免疫功能等功效。由于植物样品的复杂基质以及具有一些结构和极性相似的物质,熊果酸的提取和纯化困难,因此,样品预处理是熊果酸分析过程的关键部分。在线固相萃取(SPE)是最常用的样品预处理技术,它能降低有机溶剂消耗、缩短样品采集和预处理时间、简化操作的过程,能够实现复杂样品分离、富集、纯化、分析检测自动有序进行,提高灵敏度和重现性。金属有机骨架(MOFs)是通过金属阳离子(或阳离子簇)与多功能有机骨架连接体的配位而形成,是最为有发展前途的先进多孔结构材料之一,它有大的比表面积、高的孔隙率、均匀的孔径和结构的多样性。通过在聚合物整体柱中加入MOF材料,使得聚合物整体柱的比表面积及吸附性能得到显著改善。本文通过氧化还原引发法制备了两种MOF-聚合物整体柱,并成功应用于中草药中熊果酸的在线纯化与富集及分析。第一个实验使用衍生化MOF-199和N-羟甲基丙烯酰胺(NMA)作为共聚单体,通过氧化还原引发制备MOF-聚合物整体柱。然后用扫描电子显微镜(SEM)和氮吸附-脱附等温线来表征所获得的整体柱。它被用作SPE吸附剂,通过与高效液相色谱(HPLC)仪连接在线富集与纯化熊果酸。MOF-聚合物整体柱显示出吸附量较大以及渗透性良好等性能。在最佳条件下,校准方程为y=79.854x+0.1939,线性回归系数为0.9993,检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.17μg/mL和0.57μg/mL,日间和日内精密度<6.44%,回收率在86.52-105.26%之间。第二个实验利用原位自由基聚合方式,以衍生化UiO66-2COOH和N-异丙基丙烯酰胺(NIPAAm)为共聚单体制得MOF-聚合物整体柱。制备所得的整体柱具备相对均匀的孔隙结构及相对高的比表面积(84.16 m~2/g)的特征。该整体柱用作SPE吸附剂,通过高效液相色谱法在线纯化和富集中草药样品中的熊果酸。5种中草药样品的日内和日间检测的相对标准偏差(RSD)分别为1.00-3.67%和2.43-5.76%,回收率在92.2-103.28%之间。结果表明,以制备的两种MOF-聚合物整体柱为吸附剂建立的在线SPE-HPLC法对夏枯草、车前草、白花蛇舌草等多种中草药样品中的熊果酸具有一定的富集和纯化功能,该SPE-HPLC法还有重复性良好、回收率高、LOD低等优点。
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