生化药物是从生物体分离、纯化以及用化学合成、微生物合成或现代生物技术所得的用于预防、治疗和诊断疾病的生化基本物质。多肽和氨基酸药物是生化药物的重要组成部分,本论文主要围绕氨基酸及多肽类药物的质量控制技术研究展开,对多种氨基酸和多肽类药物制剂中的主成分及辅料和缓冲成分展开研究。第一部分内容是氨基酸及多肽类药物主成分含量测定方法研究,以门冬氨酸钾镁注射液、脾氨肽口服溶液、亮菌口服溶液为研究对象。首先对门冬氨酸钾镁注射液中主成分和杂离子测定方法进行研究,借助混合模式色谱法以及通用型电雾式检测器,实现了门冬氨酸钾镁注射液中主成分门冬氨酸、钾离子、镁离子以及杂离子-钠离子的同时测定。通过单因素分析,分别考察柱温、初始有机相比例、缓冲盐种类、浓度及pH值对色谱分离的影响,对混合模式色谱保留机理进行解释。在单因素实验基础上设计四因素三水平响应面实验,最终得到优化色谱条件。建立的优化混合模式色谱法灵敏度高、重复性好、准确可靠且节约时间成本,可替代离子色谱和高效液相色谱法等多种方法,应用于门冬氨酸钾镁注射液的质量控制。其次对真菌提取液(亮菌口服溶液)和动物脾脏提取液(脾氨肽口服溶液)中氨基酸以及蛋白质、多肽的测定方法进行研究,建立了两类多组分氨基酸、多肽类药物中游离氨基酸和总氨基酸测定的色谱方法,以总氨基酸含量与游离氨基酸含量的差值间接测定药物中多肽或蛋白质含量,实现了主成分游离氨基酸和蛋白质、多肽含量的同时分析。所建立的游离氨基酸和总氨基酸测定方案克服了比色法测定多肽和蛋白质时干扰物质多、专属性差的不足,采用柱前在线衍生法利用仪器自动在线衍生,方法简便、重复性好,能为其他类型多组分生化药物的质量研究提供借鉴,为复杂多组分氨基酸、多肽类药物的作用机理研究奠定物质基础。第二部分内容是氨基酸及多肽类药物中辅料及缓冲液测定方法研究,以复方氨基酸(15)双肽(2)注射液和注射用重组抗EGFR人鼠嵌合单克隆抗体为研究对象。首先对复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中游离酸(醋酸、柠檬酸)、游离氨及钠离子的测定方法进行研究,考察多种分析技术,经过色谱条件优化,分别建立了离子排斥色谱法测定醋酸、阴离子交换色谱法测定柠檬酸以及阳离子交换色谱法测定游离氨、钠离子的方法。三种分析方法均经方法学验证,准确度、灵敏度、重复性以及线性范围等均满足检测要求。采用酸性、碱性水相流动相,无需添加任何有机试剂,无毒环保。建立注射液中游离酸、游离氨以及其他离子型成分的测定方法,可以对注射液进行处方工艺的推测,有利于注射液一致性评价工作的开展。其次研究注射用重组抗EGFR人鼠嵌合单克隆抗体中辅料的检测方法,对样品前处理方法进行优化,建立了热变性蛋白前处理方法,克服了磺基水杨酸沉淀蛋白后蔗糖不稳定的现象。经过色谱优化,最终分别建立了该单抗药物制剂中辅料蔗糖和聚山梨酯80的测定方法。建立注射剂中辅料的测定方法,有助于全面控制药物质量,在药物发挥有效性的同时保证用药的安全性。综上,本论文研究工作借助多种分析手段和分析技术,建立氨基酸和多肽类药物的主成分以及辅料和缓冲性成分的测定方法,有助于该类药物质量标准的提升以及药物一致性评价工作的顺利开展。