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我们应用氧化酶法、双抗体放射免疫法和酶标免疫吸附测定法测定PCOS组和对照组的血清及卵泡液中的Glu、Ins、IGF-1、VEGF及IGF-Ⅱ、VEGF水平;应用免疫组化的SP法测定Ir、IGF-1r、IGF-1、VEGF在PCOS组和对照组卵巢组织中的表达;应用原位杂交的方法测定IGF-1mRNA、VEGFmRNA在PCOS组和对照组卵巢组织中的表达;应用临床观察法观察临床指标。结果发现:1、PCOS组患者血清T、Ins、IGF-Ⅰ、VEGF、卵泡液VEGF水平均明显高于对照组,而卵泡液IGF-Ⅱ则低于对照组;PCOS患者黑棘皮征阳性组空腹Ins、T水平高于阴性患者,IGF-Ⅰ比值则低于阴性者;病例组内各指标间的相关性分析显示血清中Ins与Glu、血清中VEGF与Glu、血清中T与Ins、血清中VEGF与Ins间呈线性相关。2、免疫组化结果显示:Ir在卵巢组织各细胞成分包括卵泡颗粒细胞,卵泡膜细胞及间质细胞均有Ir表达。Ir主要集中表达于血管周围,在血管内皮细胞表达尤其丰富,在增生血管的表达更为明显;在各组切片均未见IGF-Ⅰr表达,IGF-Ⅰr主要表达于窦前卵泡,本实验所有8mm卵泡细胞成分中,均未得出免疫组化阳性结果,可能因IGF-Ⅰr表达甚微所致;IGF-Ⅰ在卵巢组织各细胞成分包括颗粒细胞、泡膜细胞表达,而间质细胞不表达,小卵泡颗粒细胞也可表达IGF-1。IGF-1在PCOS组颗粒细胞比正常组表达增高,而在泡膜细胞中的染色强度与对照组无显著差异;VEGF在卵巢组织各细胞成分包括颗粒细胞、泡膜细胞及间质细胞表达、基质细胞弱阳性表达、卵泡中卵泡液也有弱阳性表达,初级卵泡不表达或者卵泡部分细胞弱阳性表达,小动脉表达,小的毛细血管不表达。初级到次级卵泡的VEGF表达明显由弱到强,两级卵泡表达强度差异显著。PCOS组和对照组卵巢的颗粒细胞和间质细胞VEGF表达强度差异显著。泡膜细胞散在表达,随着卵泡发育,VEGF在卵泡膜细胞层,表达强度恒定,颗粒细胞层及卵泡中的表达逐渐增强。3.原位杂交结果显示:IGF-ⅠmRNA在颗粒细胞、泡膜细胞表达但间质细胞几乎不表达,在PCOS组比对照组颗粒细胞表达增高,而在泡膜细胞中的染色强度与对照组无显著差异,小卵泡颗粒细胞也可表达IGF-1mRNA;VEGFmRNA在颗粒细胞、泡膜细胞及间质细胞表达、细胞基质弱阳性表达、卵泡中卵泡液也有弱阳性表达,初级卵泡不表达或者卵泡部分细胞弱阳性表达,小动脉血管表达,小的毛细血管不表达。初级到次级卵泡的VEGFmRNA表达明显由弱到强,两级卵泡表达强度差异显著。PCOS组和对照组卵巢的颗粒细胞和间质细胞VEGFmRNA表达强度差异显著。泡膜细胞散在表达,随着卵泡发育,VEGFmRNA在卵泡膜细胞层,表达强度恒定,颗粒细胞层及卵泡中的表达逐渐增强。4.观察PCOS患者与糖脂代谢相关的临床资料显示:肥胖发生率63.15%(人群25%),黑棘皮症阳性发生率47.37%,高血压发生率10.53%(人群11.26%),高血脂发生率13.16%,高空腹血糖发生率18.42%,高空腹胰岛素发生率68.42%。在腹腔镜及手术中发现PCOS患者卵巢血管较正常妇女丰富。光镜下HE染色及电镜观察PCOS患者卵巢间质细胞/卵泡外膜细胞明显增生。本研究结果提示:1. PCOS组高空腹血清IGF-I、Ins、T,血清T水平与空腹血清Ins呈明显直线相关,空腹血清Ins与空腹血清Glu呈明显直线相关,PCOS患者体内升高的IGF-I可能通过竞争性结合了Ⅰr而未发挥与Ins同样的调节糖脂代谢的作用,进而参与了PCOS患者的胰岛素抵抗形成。严重的IR,严重高胰岛素血症可能导致黑棘皮征,IR、CHI和高T间可能存在互相促进的恶性循环。通过各种途径促进雄激素的合成和分泌,导致其卵泡发育障碍、优势卵泡选择受阻、大量小窦状卵泡积聚及排卵异常。2、PCOS组卵泡液IGF-Ⅱ水平低,血清Ins、IGF-Ⅰ水平高,通过各种途径促进雄激素的合成和分泌,导致其卵泡发育障碍、优势卵泡选择受阻、大量小窦状卵泡积聚及排卵异常在PCOS的发生及发展中起了重要作用。3.卵巢组织各细胞成分包括卵泡颗粒细胞,卵泡膜细胞及间质细胞均有Ir表达,卵巢受体表达均以Ir为主,且未发现有IGF-Ir表达,Ir主要集中表达于血管周围,在血管内皮细胞表达尤其丰富,在增生血管的表达更为明显,可推测卵巢是Ins作用的另一个靶器官,Ins和IGFs在卵巢主要通过与Ir结合而发挥作用并可能有刺激血管生成的作用,这一作用亦可能是Ins, IGFs促进PCOS发展的途径之一,表明Ins和Ir可能参与卵巢功能的调节,参与PCOS的发生及发展。4、在PCOS卵巢颗粒细胞IGF-1蛋白,IGF-1mRNA表达高,与有大量Ⅰr、IGF-Ⅰr的颗粒细胞结合使卵泡闭锁,停止发育,在PCOS的发生及发展中起了重要作用。5、PCOS组血清VEGF、卵泡液VEGF水平均明显高于正常对照组,血清VEGF水平与空腹血清Ins呈明显直线相关,PCOS组初级和次级卵泡VEGF蛋白、VEGFmRNA表达明显由弱到强,次级卵泡表达高,卵巢的颗粒细胞和间质细胞VEGF表达强。胰岛素可能增加VEGF基因的转录实现VEGF水平升高,VEGF可以促使增加卵巢间质血管化,卵泡周围血管生成,参与了PCOS的发生发展。6、PCOS患者与糖脂代谢相关的临床资料显示PCOS患者存在严重的糖脂代谢紊乱,间质增生,血管异常增生,这些与PCOS的卵巢形态改变和体征有关。