硝基苯对公鸭肝脏损伤机制的研究

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硝基苯(NB)是一种应用广泛的重要化工有机合成原料,但同时也是环境中重要的污染物之一,并被美国环保局规定为环境中优先监测污染物。已有研究表明,NB的长期接触对人体及动植物危害极大,可以引起机体发生氧化损伤、细胞凋亡、坏死等病理变化,但目前NB的毒理学研究主要集中在哺乳动物和鱼类,对于禽类的研究较少。本试验以育成公鸭为研究对象,对其进行不同浓度NB灌胃染毒,通过对受试公鸭肝脏显微结构和超微结构的观察、细胞凋亡率、肝微粒体P450酶系的活性和含量及其相关基因表达情况、血清或/和肝脏的抗氧化功能、血清肝功能和肝脏酶组织化学的检测,研究了硝基苯对育成公鸭肝脏结构和功能,以及肝脏P450酶系、抗氧化功能和细胞凋亡的影响,并对其毒性作用机理进行了初步探讨,为全面评价NB对禽类的生态毒理效应提供科学依据。研究结果表明:1.通过剖检变化、显微和超微结构的观察,以及血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白/球蛋白(A/G)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)和总胆汁酸(TBA)等肝脏功能指标活性或含量的检测,说明NB能够损伤公鸭的肝脏组织;2.通过血清和肝脏抗氧化功能的检测,表明NB能够诱导公鸭肝脏组织发生氧化应激,导致谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)含量降低,丙二醛(MDA)含量升高,并且影响肝脏中一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性,从而破坏机体抗氧化防御系统及清除自由基功能,造成公鸭肝脏组织发生氧化损伤,这可能是NB对肝脏的损伤机制之一;3.通过肝脏酶组织化学的检测,说明NB能够改变酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、Mg2+激活的三磷酸腺苷酶(Mg2+-ATPase)、Ca2+激活的三磷酸腺苷酶(Ca2+-ATPase)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的活性,进而影响肝脏的正常功能;4.通过TUNEL法对肝脏细胞凋亡的检测,表明NB经口染毒可以使肝脏细胞凋亡指数显著升高,诱导公鸭肝脏细胞发生凋亡,这可能是NB对肝脏损伤作用的重要诱导因素;5.通过肝微粒体P450酶系的活性及其基因表达情况的检测,显示NB能够影响肝微粒体细胞色素P450和b5的含量、NADPH-细胞色素C还原酶(CR)、氨基吡啉-N-脱甲基酶(AND)、红霉素-N-脱甲基酶(ERND)和7-乙氧基香豆素O-脱乙氧基酶(ECOD)的活性,及其相关基因CYP1A5和CYP3A37 mRNA的表达,从而干扰P450酶系的正常功能,加剧机体内的氧化损伤,说明P450酶系与机体内的氧化应激作用共同参与NB对肝脏的损伤过程。综上所述,NB可以影响公鸭肝脏P450酶系、抗氧化功能和肝组织酶活性,改变肝脏的正常生理功能,导致氧化应激的发生,并诱导肝脏细胞发生凋亡,造成肝脏组织的病理损伤,从而发挥其毒性作用。
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