Galectin-3沉默对胃癌细胞SGC-7901生长及化疗敏感性影响的实验研究

被引量 : 0次 | 上传用户:hangcheng8351
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:初步探讨siRNA沉默胃癌细胞SGC-7901中Galectin-3的表达后,细胞增殖、凋亡及对奥沙利铂化疗敏感性的变化。方法:根据Genbank中Galectin-3的编码区基因序列NM-002306及相关参考文献,合成特异性针对Galectin-3的siRNA及与Galectin-3无关的阴性对照siRNA,瞬时转染胃癌细胞SGC-7901;实验分为4组:空白对照组、空脂质体组、阴性siRNA组及Galectin-3siRNA组;利用Real time PCR技术测定转染后24h各组细胞Galectin-3在mRNA水平上的相对表达量;Western blot技术检测转染后72h各组细胞Galectin-3在蛋白水平上的相对表达量;CCK-8法测定各组细胞在转染后24h、48h、72h的A值,根据公式(1-实验组A值/空白对照组A值)*100%计算细胞增殖抑制率;AnnexinⅤ/PI染色,流式细胞仪检测转染72h后各组细胞凋亡率;细胞转染后,加入不同浓度的奥沙利铂(5、10、20、40、80ug/ml)培养48h,CCK-8法观察各组细胞的细胞增殖抑制率。结果:用荧光标记的siRNA转染24h后,采用流式细胞仪检测转染效率,结果为83.8%,符合后续实验要求;以△Ct值表达各实验组Galectin-3在mRNA水平的相对表达量,结果显示Galectin-3siRNA组表达量较空白对照组降低了87.8%(P<0.05),以Galectin-3与内参的灰度值比值表达Galectin-3在蛋白水平的表达量,结果显示Galectin-3siRNA组表达量较空白对照组降低了90.4%(P<0.05),而空脂质体组、阴性siRNA组与空白对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05),证明通过转染siRNA成功抑制Galectin-3在mRNA及蛋白水平的表达;转染后24h、48h和72h,Galectin-3siRNA组细胞增殖抑制率分别为(15.57±1.45)%、(32.90±0.76)%、(57.35±1.05)%,与其余对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);转染72h后,细胞凋亡率空白对照组为(21.87±1.36)%,空脂质体组为(24.67±1.40)%,阴性siRNA组为(27.73±2.55)%,Galectin-3siRNA组细胞凋亡率为(46.17±2.39)%,明显高于其余3个对照组,差异有统计学意义(P<0.05);单用不同浓度(5、10、20、40、80ug/ml)奥沙利铂处理的空白对照组,48h的细胞抑制率分别为(13.30±0.21)%、(26.82±0.55)%、(34.72±0.47)%、(41.32±0.05)%、(50.28±0.13)%,而用Galectin-3siRNA与奥沙利铂同时处理后,48h细胞抑制率显著提高,分别为(19.94±0.61)%、(40.04±0.14)%、(62.04±0.13)%、(81.13±0.68)%、(90.59±0.68)%,差异有统计学意义(P<0.05)。而其余各对照组之间,差异无统计学意义(P>0.05)。说明转染Galectin-3siRNA后,SGC-7901细胞对不同浓度奥沙利铂的化疗敏感性均提高。结论:1.本实验通过转染Galectin-3siRNA成功下调了胃癌细胞SGC-7901中Galectin-3的表达;2.胃癌细胞SGC-7901中Galectin-3的表达下降后,细胞增殖受抑制,凋亡增加;3.抑制胃癌细胞SGC-7901中Galectin-3的表达后,细胞对奥沙利铂的化疗敏感性增加。
其他文献
<正> 据联合国教科文组织估计,目前,全世界有近六万种报纸,其中日报有八千种,总发行量约为五亿份,而读者人数很可能三四倍于发行份数。欧洲报纸发行量占世界报纸总发行量的一
三峡水利枢纽工程举世瞩目,具有防洪、发电、航运等综合效益,是对长江开发治理的主干工程。三峡工程分别在2003年6月首次成库,2006年10月和2008年11月分别完成二期蓄水和三期
互联网金融的兴起,对商业银行造成了严峻的挑战,引发了金融脱媒现象(技术脱媒、信息脱媒、渠道脱媒等),文章从中间业务、信贷业务、理财业务三个方面分析了互联网金融对商业
高校马克思主义理论教育既是全民马克思主义理论教育的主要组成部分,也是高校思想品德教育的重要实施形式。本文分析了当前我国高校马克思主义理论教育存在的问题,指出新形势
近些年来,互联网发展迅速,已经渗透到人们生活的方方面面。餐饮业市场潜力巨大,但受全球性金融危机的影响,餐饮消费市场也受到一定冲击,消费者消费意愿的降低,导致整个餐饮行
英国著名的语言学家D.A Wilkins曾经说过:"没有语法,人们不能表达很多东西;而没有了词汇,人们则无法表达任何东西。"由此可见,英语词汇教学在英语教学中的作用举足轻重。本文
库存管理是供应链管理的重要组成部分,在当今日益激烈的市场竞争环境中,库存管理与整个供应链的整体利益具有十分密切的关系,这对企业核心竞争力的影响更大,所以,研究如何建
射流盘是偏导射流伺服阀中的关键零件,其加工质量对伺服阀的工作性能有着重要影响。因此需要对其相关尺寸和公差进行精准测量,提高射流盘检测的准确性和一致性,从而保证伺服阀的
伴随着中国国家实力的增强,国家越来越鼓励企业走上国际化的道路。但是随着国际竞争的日趋激烈,给我们带来了诸多的挑战同时也有更大的发展机遇。利奥多公司就在这样的背景下