木犀草素对糖尿病大鼠视网膜病变氧化应激通路的影响

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目的观察木犀草素对糖尿病大鼠视网膜中VEGF表达、SOD活性、MDA含量及HO-1、Nrf2mRNA相对表达量的影响,分析其对糖尿病大鼠视网膜抗氧化应激作用的影响。方法确定本试验研究对象是Sprague Dawley(SD)雄性大鼠,手持检眼镜观察大鼠眼前节及眼底情况,采用随机数字表法将实验动物分为空白组(NC组)10只和模型组45只,模型组大鼠诱导成为糖尿病大鼠,方法是采用以链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)分两次进行腹腔注射。48h后,取大鼠尾静脉测量随机血糖,标准为血糖≥16.7mmol/L,代表造模成功。一周后,按照随机数字表法抽取对照组(DM组),低、中、高剂量木犀草素治疗组(低、中、高LUT组),每组各10只,均灌胃给药,每日一次,连续12周。给药后每周监测大鼠尾尖随机血糖及体重。于12周处死实验大鼠并摘除眼球,通过苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)观察视网膜形态,免疫组化法查血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)平均光密度值,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量,硫代巴比妥酸法测量丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,实时荧光定量核酸扩增检测系统(Real-time Quantitative PCR Detecting System,qPCR)查核因子NF-E2相关因子(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、血红素氧化酶(heme oxygenase 1,HO-1)mRNA相对表达量。结果1、模型组血糖较NC组显著升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。各LUT组血糖与DM组血糖无明显差异(P均>0.05)。2、HE染色:DM组大鼠视网膜形态改变,神经节细胞数目减少,胞浆水肿。各LUT组大鼠视网膜较DM组均有所减轻,高LUT组视网膜层次最为清楚,神经节细胞数目多,排列规则,染色均匀,异态细胞少。3、各组大鼠视网膜组织中均可见VEGF的阳性表达,主要分布于视网膜节细胞层。DM组较NC组MODVEGF升高,差异有统计学意义(P<0.05);各LUT组MODVEGF较DM组均有下降趋势,其中,高LUT组降低MODVEGF效果最好,差异具有统计学意义(P<0.05)。4、DM组SOD活性较NC组活性下降、MDA含量较NC组上升,差异均有统计学意义(P均<0.05);各LUT组较DM组SOD活性上升、MDA含量下降,其中,高LUT组增强SOD活性、降低MDA含量的效果最好,差异具有统计学意义(P均<0.05)。5、DM组Nrf2、HO-1mRNA相对表达量较NC组下降,差异均有统计学意义(P均<0.05);各LUT组较DM组Nrf2、HO-1mRNA表达上调,其中,高LUT组上调Nrf2、HO-1mRNA的效果最好,差异具有统计学意义(P均<0.05)。结论低、中、高剂量木犀草素均可以激活Nrf2/HO-1通路,增强SOD活性,减少MDA含量,抑制VEGF表达对糖尿病大鼠视网膜起到保护作用,且高剂量效果更好。图14幅;表13个;参91篇。
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