人睾丸特异表达基因VCY编码蛋白质功能的初步研究精子发生相关基因数据库的构建

来源 :中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ys331223
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人Y染色体上的基因具有男性特异的重要生物学功能,与男性性征有着直接的关系.VCY(Variable Charge Y)是定位于Y染色体上的睾丸特异基因.为研究VCY的功能,我们设计了相应的引物并PCR扩增人睾丸RT产物获得其cDNA全长.构建了原核表达重组质粒,在大肠杆菌中大量表达后,通过SDS-PAGE切胶回收获得了高纯度的表达产物,进而免疫家兔获得相应的抗体.我们用Western blot检测了抗体的特异性,并在人睾丸免疫组织化学实验中对VCY编码蛋白表达进行了定位观察,发现它表达于精原细胞和精母细胞中,并且在细胞核部位相对集中.我们还将VCY基因cDNA全编码区克隆到pDsRed1-N1载体中,荧光蛋白显示VCY基因在COS7细胞的细胞核中表达.该文重点叙述了如何利用生物信息学方法收集并整理精子发生相关基因数据,建立一套完整的数据信息管理与发布系统.为了满足不断更新的数据,我们建立了新基因提交、基因新资料更新页面,使用者通过其可直接提交数据,系统自动审核后会将输入的数据按照固定格式存储于数据库中,这避免了管理人员烦琐的数据库系统操作,利于数据库的维护.
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