小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起的主要侵害4-20日龄雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性、高度接触性和败血性传染病,以急性肠炎及肝、肾、心等实质脏器炎症为主要特征。该病病程短,传播速度快,死亡率高,是目前危害养鹅业健康发展的最重要的传染病之一小鹅瘟病毒是细小病毒科、细小病毒属成员,属自主复制型细小病毒。病毒基因组为单股、线性DNA,核甘酸序列长约5.1kb,含有两个开放阅读框架(ORF),左侧ORF(LORF)编码非结构蛋白NS1和NS2；右侧3RF (RORF)编码3种结构蛋白(VP),即’/P1、VP2、VP3。其中VP3是该病毒的主要衣壳蛋白和重要保护性抗原,且能诱导机体中和抗体。因此小鹅瘟病毒VP3基因在该病的诊断及预防上具有及其重要的意义。本试验根据GenBank发表的小鹅瘟病毒B株全基因序列,针对VP3基因保守区,设计了一对扩增主要结构蛋白VP3基因的特异性引物,对小鹅瘟病毒延边分离株基因组DNA进行了PCR扩增,得到了1457bp小鹅瘟VP3基因片段,对所克隆的VP3基因序列与基因库中已发表的B株进行比较分析,结果表明同源性高达96.8%,从而证明了该基因片段为小鹅瘟VP3基因。将VP3基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-1上,经PCR鉴定及酶切鉴定,证明成功构建了表达载体pGEX-VP3。将构建好的表达载体,经1 mmol／L的IPTG诱导,在大肠杆菌BL21中进行表达,经过8 h表达量达到高峰。该融合蛋白pGEX-VP3的分子量为81 ku,表达蛋白大部分以包涵体的形式存在。经Western-Blotting免疫印记分析,该融合蛋白具有较好的反应原性。接种BABL/c小鼠后,能够提高机体的体液免疫水平,进而表明该融合蛋白也具有较好的免疫原性。本试验为进一步研究小鹅瘟病毒分子生物学特性奠定了基础,同时为研制小鹅瘟的诊断试剂和基因工程疫苗做了前期准备工作。