脱镁叶绿酸a是叶绿素的天然降解产物,也是合成二氢卟吩类化合物的重要起始原料,但提取制备的脱镁叶绿酸a产品纯度较低且成分复杂,分离纯化得到高纯度的脱镁叶绿酸a样品比较困难,因此脱镁叶绿酸a的分析和制备纯化工作有非常重要的意义。常压硅胶柱层析柱效较低分离效果较差,而高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)柱压和柱效高,尤其是在分析技术的基础上发展了高效液相制备色谱技术,使分离困难的样品可以快速的规模化、连续化的制备,获得高纯度得产品。本研究课题以产自云南程海湖中的钝顶螺旋藻为原料,提取制备得到了CHP(Chenghai Pheophorbide)粗产品,对其以下几个方面进行了详细的研究:利用高效液相色谱技术优化得到了适合CHP的乙腈-水-缓冲盐体系的分析条件,使用大连化学物理研究所自制的Z7-C18ME色谱柱,流动相为乙腈:水:醋酸铵缓冲盐(100mM)=17:2:1(体积比)。HPLC分析谱图结合质谱测得的分子离子峰信号初步确定主要组分CHP的含量为57%,其余杂质包括CHP异构体、焦脱镁叶绿酸a以及CHP的O-异质同晶体等氧化降解产物。优化了甲醇-醋酸铵缓冲盐体系下的CHP粗产品的正相色谱和反相色谱的分析条件,最终选择的分析条件为使用Z7-C18ME色谱柱,流动相为甲醇:醋酸铵缓冲盐(100mM)=9:1(体积比),反相条件下使用10mm直径的Z7-C18ME色谱柱进行了半制备,得到的CHP纯度达到95%以上。利用优化后的反相色谱分析条件扩大制备规模,使用创新通恒LC6000制备系统,开发了一种可以连续制备的分离纯化方法。在50mm直径的制备色谱柱对CHP粗产品进行了分离纯化,提高了CHP产品的纯度,高效液相色谱分析显示纯度达95%以上,平均回收率达到94.3%。实验过程中发现CHP和CHP差向异构体在溶液状态下会相互转化并达到一个平衡状态,二者之间的比例稳定在CHP:CHP异构体=17:3左右。测试了它们在不同有机溶剂中的稳定性,结果显示CHP在DMSO、四氢呋喃溶剂中稳定性差,CHP会迅速转化为CHP异构体并达到平衡状态,而CHP在甲醇、二氯甲烷中到达平衡的时间较慢。