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研究目的:通过实验观察他克莫司对阿霉素肾病大鼠肾组织klotho蛋白含量变化的影响,并初步探讨他克莫司对阿霉素肾病大鼠肾组织klotho蛋白及氧化应激影响的研究。研究方法:将60只雄性wister大鼠随机分为4组即:对照组(NC组)、阿霉素肾病模型组(ADR组)、奥美沙坦脂治疗组(OLM组)和他克莫司治疗组(FK506组),每组各15只。其中ADR组、OLM组、FK506组分别给予一次性尾静脉注射阿霉素5mg/kg构建阿霉素肾病模型,NC组给予一次性尾静脉注射等量生理盐水,造模成功后,OLM组、FK506组分别连续12周给予奥美沙坦脂10mg/(kg.d),他克莫司0.5mg/(kg.d)灌胃治疗,NC组及ADR组分别予等量生理盐水灌胃治疗。于4、8、12周末分别收集大鼠24小时尿液并检测24小时尿蛋白含量;每组分别于给药后第4、8、12周末各处死5只大鼠,测定阿霉素肾病大鼠肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,作为阿霉素肾病大鼠肾组织氧化应激反应的指标;HE染色观察阿霉素肾病大鼠肾脏组织形态学,免疫组织化学(IHC)检测阿霉素肾病大鼠肾组织中klotho蛋白表达水平,定量即时聚合酶链锁反应(q-PCR)检测阿霉素肾病大鼠肾组织中klotho mRNA的水平,检测阿霉素肾病大鼠肾组织中klotho蛋白含量的表达使用蛋白质免疫印迹法(Western blot)。研究结果:(1)在同一时间段内,ADR组及药物治疗组各时间点24h尿蛋白定量均高于NC组,OLM组及FK506组大鼠24小时尿蛋白含量均较ADR组降低,FK506组大鼠24小时尿蛋白含量均较OLM组降低,且差异均有统计学意义(F=126.969~781.905,P<0.05);在同一组别之间,随着时间的进展ADR组24小时尿蛋白含量进行性升高,OLM组及FK506组24小时尿蛋白含量进行性降低,且差异均具有统计学意义(F=16.957~182.942,P<0.05);(2)在同一时间段内,ADR组及药物治疗组大鼠肾组织中SOD活性均较NC组降低,OLM组及FK506组大鼠肾组织中SOD活性均较ADR组升高,FK506组大鼠肾组织中SOD活性均较OLM组升高,且差异均具有统计学意义(F=125.782~467.589,P<0.05);在同一组别之间,随着时间的进展ADR组大鼠肾组织中SOD活性进行性降低,OLM组及FK506组大鼠肾组织中SOD活性进行性升高,且差异均具有统计学意义,(F=6.871~57.072,P<0.05)。在同一时间段内各组之间比较,ADR组及药物治疗组大鼠肾组织中MDA活性均较NC组升高,OLM组及FK506组大鼠肾组织中MDA活性均较ADR组降低,FK506组大鼠肾组织中MDA活性均较OLM组降低,且差异均具有统计学意义(F=52.782~162.589,P<0.05);在同一组别之间,随着时间的进展ADR组大鼠肾组织中MDA活性进行性升高,OLM组及FK506组大鼠肾组织中MDA活性进行性降低,且差异均具有统计学意义,(F=6.871~57.072,P<0.05);说明奥美沙坦脂和他克莫司均具有减轻阿霉素肾病大鼠肾组织氧化应激的作用,且他克莫司减轻氧化应激的作用优于奥美沙坦脂。(3)在同一时间段内各组之间比较,ADR组及药物治疗组大鼠肾组织中klotho相对表达量均较NC组降低,OLM组及FK506组大鼠肾组织中klotho相对表达量均较ADR组升高,FK506组大鼠肾组织中klotho相对表达量均较OLM组升高,且差异均具有统计学意义(F=116.671~609.513,P<0.05);在同一组别之间,随着时间的进展ADR组大鼠肾组织中klotho相对表达量进行性降低,OLM组及FK506组大鼠肾组织中klotho相对表达量进行性升高,且差异均具有统计学意义,(F=10.985~40.485,P<0.05)。研究结论:(1)阿霉素肾病大鼠肾脏中存在氧化应激损伤,氧化应激相关因子MDA水平升高SOD活性降低;(2)在阿霉素肾病大鼠肾脏中发生氧化应激损伤时klotho mRNA及klotho蛋白表达均降低;(3)使用他克莫司或奥美沙坦脂对阿霉素肾病大鼠进行治疗时,可提高阿霉素肾病大鼠肾脏中klotho mRNA及蛋白的表达,且他克莫司增加klotho mRNA及蛋白表达的效果较奥美沙坦脂更加显著,其促进klotho mRNA及蛋白表达的效果可能是通过抑制阿霉素肾病大鼠肾脏氧化应激来实现的。