耐酸苜蓿根瘤菌的定殖研究

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紫花苜蓿是一种优质豆科牧草,有“牧草之王”的美称。近年来,随着对紫花苜蓿需求量的增加,紫花苜蓿产业化进程加快,苜蓿在酸性土壤上种植的呼声也愈高。在我国,紫花苜蓿主要种植在北方中性和碱性土壤上。随着西部大开发和退耕还林还草工作的进一步深入,我国实施了“北草南引”的计划。“北草南引”是推进紫花苜蓿在我国南方种植的重大举措。然而,我国南方酸性土壤分布广、面积大,紫花苜蓿是对酸最敏感的豆科牧草,酸性土壤的存在严重阻碍了紫花苜蓿的“北草南引”及其产业化进程。因此在南方酸性土壤上接种耐酸根瘤菌建立高效共生抗逆系统显得尤为重要。苜蓿根瘤菌与苜蓿的共生是长期以来研究苜蓿的重要方面,高效耐酸苜蓿根瘤菌接种苜蓿将有助于在我国南方建立抗逆的苜蓿高效固氮系统。随着豆科植物在酸性土壤中的应用日益推广,接种耐酸根瘤菌已经作为提高酸性土上豆科牧草产量和品质的重要途径。而所接种根瘤菌在土壤中生存定殖能力的强弱直接影响着接种的效果。同时,根瘤菌施入土壤以后,对根际其他微生物和微生物生物量均有一定的影响。因此,加强根瘤菌根部定殖的研究对于揭示有益细菌在根圈的微生态学特征、提高其根际适应性和增产效果的稳定性具有十分重要的意义。同时,Ca2+作为一种信号传递因子,是一种能促进苜蓿根瘤菌耐酸的重要因子,其促进苜蓿根瘤菌及其共生系统耐酸的作用已得到了一定的研究。因此,本研究在缙云山酸性土壤上接种耐酸苜蓿根瘤菌,并施用不同浓度的Ca2+,探讨其在酸性土壤上的定殖及其对苜蓿根际土壤微生态环境的影响,进而分析了施Ca2+和接种耐酸苜蓿根瘤菌对紫花苜蓿共生效应的影响。可以为在南方紫花苜蓿新种植区接种高效耐酸苜蓿根瘤菌提供一定的理论和技术依据。研究的主要结果如下:1.采用裂区设计缺三区处理,在缙云山酸性土壤中(pH4.6)接种三株由本实验室分离的耐酸苜蓿根瘤菌91522、91512、91532,并施用不同浓度的Ca2+(0mmol/L、5mmol/L、10mmol/L),结果表明:三种耐酸苜蓿根瘤菌均能在酸性土中定殖,且定殖动态基本一致,三种供试菌株与对照相比,其定殖数量没有显著性差异,但三种供试菌株的定殖数量均高于对照,以接种菌株91512和91532的效果最好。施Ca2+处理对根瘤菌定殖影响不明显,但仍以施5mmol/LCa2+时,定殖效果最佳。说明接种耐酸根瘤菌并施用适当浓度的Ca2+,对根瘤菌在酸性土壤中的定殖有一定的促进作用;2.施Ca2+和接种耐酸苜蓿根瘤菌对苜蓿根际土壤微生物数量及其生物量的影响明显,其差异达到显著和极显著水平。其中,接着耐酸苜蓿根瘤菌后,细菌、真菌和微生物生物量均显著增加,而放线菌数量稍增加,未达到显著性差异。而三种菌株(91522、91512、91532)之间差异不显著。施Ca2+仅对细菌数量有显著性增加,而对其它微生物未产生显著性影响。可见在酸性土壤上,接种耐酸苜蓿根瘤菌和施Ca2+,改变了根际营养成分,有利于微生物的生长繁殖,从而使土壤的微生态环境得到改善,提高了微生物数量和微生物生物量;3.接种耐酸苜蓿根瘤菌后土壤微生物数量及其微生物生物量与对照相比,在大部分月份均明显增加,达到显著和极显著水平。四个处理的三大类微生物数量及其生物量均在6月份达到最大值。可见,随着根瘤菌的定殖,植株根系的生长发育,根系分泌物随之增加,为根际微生物提供了大量的能源,再加上土壤适宜的温湿条件,有利于各种微生物的生长繁殖。因而,使微生物的数量和微生物生物量达到了最大值;4.检测了施Ca2+和接种耐酸苜蓿根瘤菌对紫花苜蓿共生效应的影响。结果表明,接种耐酸苜蓿根瘤菌和施Ca2+对苜蓿植株瘤重、根鲜重、株高和植株上部鲜重的影响显著。其中接种菌株91512对苜蓿瘤重、株高和地上部鲜重的影响最大,根鲜重则以接种菌株91532的效果最好;而施Ca2+处理则以施5mmol/LCa2+时对共生效应的影响最大。说明接种耐酸苜蓿根瘤菌、施用适当浓度的Ca2+以及共生系统良好的结瘤性能能够提高酸性土上紫花苜蓿的产量和品质;5.施Ca2+和接种耐酸苜蓿根瘤菌对酸性土壤中土壤的养分状况有所改善,接种耐酸苜蓿根瘤菌和施Ca2+5mmol/L对土壤氮有明显的影响。各处理中,土壤交换性钙的含量均减少,而施5mmol/L的Ca2+处理,土壤中交换性钙减少最少。总体上看,除土壤中交换性钙含量减少,土壤全磷保持不变外,其余土壤养分含量均有所增加,但影响不显著。说明施Ca2+和接种耐酸苜蓿根瘤菌,改善了苜蓿植株的营养条件,促进了苜蓿根系的生长和代谢,进而促进根际微生物的生长和繁殖,使土壤的微生态环境得到改善,从而加速土壤养分的积累,提高了土壤的肥力。
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