【摘 要】
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氯苯作为有害污染物的一类,因其性质组成使其在多个行业均有广泛使用,但在实际生产过程中,化工企业受生产工艺及其他因素的影响很难保证污染物零泄露。泄露后的污染物在土壤中很难短时间分解,最终会渗至地下水中。本研究以常州某化工厂遗址中污染地下水为研究对象,对其细菌微生物群落结构及理化性质进行探究,从中筛选出氯苯降解菌株。并对氯苯降解菌株的生长及降解特性进行研究,探究其降解途径,对氯苯污染地下水的环境治理与
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氯苯作为有害污染物的一类,因其性质组成使其在多个行业均有广泛使用,但在实际生产过程中,化工企业受生产工艺及其他因素的影响很难保证污染物零泄露。泄露后的污染物在土壤中很难短时间分解,最终会渗至地下水中。本研究以常州某化工厂遗址中污染地下水为研究对象,对其细菌微生物群落结构及理化性质进行探究,从中筛选出氯苯降解菌株。并对氯苯降解菌株的生长及降解特性进行研究,探究其降解途径,对氯苯污染地下水的环境治理与生物修复有重要意义。(1)本研究在采样地采集6样点4季节共24个地下水样品,应用高通量测序技术,对样地中地下水的细菌微生物群落进行测定,共检测出细菌36门,其中Proteobacteria(变形菌门)、Bacteroidota(拟杆菌门)、Firmicutes(厚壁菌门)和Actinobacteria(放线菌门)为主要优势菌门。而Proteobacteria(变形菌门)在所调查的地下水样品中均可作为优势菌门。通过对地下水的环境因子分析,结果可知,在所有污染物种类中氯苯的浓度最高,其四季浓度变化在38.60~56.80 mg/L之间。(2)将可培养微生物经传统微生物培养,进行驯化、分离、复筛后最终得到3株能够以氯苯为唯一碳源进行生长的降解菌株,经形态学观察,生理生化实验及分子生物学鉴定,WH-L1属于不动杆菌属(Acinetobacter sp.)、WH-L2属于氧化微杆菌属(Microbacterium oxydans)、WH-L3属于沙雷氏菌属(Serratia marcescens)。对培养24 h后的菌株进行降解能力测定,3株氯苯降解菌的降解率在67.88%~94.10%之间,WH-L1的降解效果达到94.10%,降解能力最强。(3)确定WH-L1的生长及降解特性:在以氯苯为唯一碳源的无机盐培养基中,pH 7.0~8.0,温度30~40℃,氯苯浓度20~80 mg/L,接种量为3%左右时菌株生长较好,活性较强。正交实验结果表明,WH-L1菌株的最适生长条件为:温度35℃,pH 7.0,氯苯初始浓度40 mg/L,接种量3%。WH-L1菌株在温度35℃,pH 7.0,氯苯初始浓度40 mg/L,接种量5%的降解体系中降解效果最强。(4)经过对菌株邻苯二酚双加氧酶的酶活检测比较,结果显示起到关键作用的是邻苯二酚-1,2-双加氧酶,将其同GC-MS及离子色谱仪测定结果结合分析,推测该菌株以邻位开环,并最终生成小分子酸等简单有机物的方式对氯苯进行降解。
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