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由于独特的栖息环境,海洋微生物能够产生具有新颖的化学结构和独特生物学活性的细胞外多糖。近年来,海洋微生物细胞外多糖研究成为研究热点。本文从菲律宾蛤仔黏附污泥中分离提取出三株具有絮凝活性的细菌,通过发酵技术获得单株菌株的纯品胞外多糖,经过浓缩、透析、醇沉、Sevage法纯化得到单一多糖组分,均为α-吡喃糖,进而解析了单株菌株胞外多糖纯品的化学组成及结构,同时评价了多糖絮凝脱色及体外抗氧化活性,主要研究结果如下:1.从Psychrobacter sp.GHF10菌株发酵液获得的单一多糖分子量为848000 Da,主要由氨基葡萄糖、核糖、甘露糖、葡萄糖组成,比例为0.51:0.12:0.26:2.93,具有-OH、C=O和C-O等官能团。GC-MS分析结果表明该多糖的糖苷键连接方式存在Manp1→2→3→4连接、Manp 1→4连接、末端Manp连接、Glcp 1→4连接、Glcp 1→4→6连接、Glc NAcp末端连接和Glc NAcp 1→6连接。该多糖具有一定絮凝脱色活性及抗氧化活性,当浓度为0.6 mg/L时最佳絮凝率为70.1%,当多糖浓度达到2 mg/L时最佳脱色率为94.2%,对DPPH·自由基及·OH自由基的半最大效应浓度EC50分别为0.23mg/L和0.37 mg/L。2.从Pseudoalteromonas sp.GHS5菌株发酵液中提取到的单一多糖分子量为634000 Da,主要是由半乳糖、甘露糖、核糖、氨基葡萄糖共同组成,其比例为0.34:1:0.09:0.17。糖苷键连接方式分析表明其存在Galp 1→3连接、Manp 1→3连接、Manp 1→6连接、Manp 1→2→3→4连接、Glc NAcp 1→3→4→6连接、Rbip 1→2→3→4连接和Rbip末端连接等连接方式。该菌株细胞外多糖浓度为0.6 mg/L时最佳絮凝率为80.1%,当浓度达到2 mg/L时最佳脱色率为93.7%,对DPPH·自由基及·OH自由基的半最大效应浓度的计算值分别为0.35 mg/L和0.15 mg/L。3.从Bacillus sp.GHS8-1菌株发酵液中提取到的单一多糖分子量为166000 Da,由甘露糖、半乳糖、氨基葡萄糖组成,比例为0.46:2.3:0.3。糖苷键连接方式存在Glc NAc1→6连接、Galp 1→4→6连接、Galp 1→3→4连接和Manp 1→6连接。当浓度为0.8mg/L时,该多糖最佳絮凝率为70.1%,当浓度达到1.5mg/L时最佳脱色率为94.2%,对DPPH·自由基及·OH自由基的半最大效应浓度分别为0.24 mg/L和0.35 mg/L。综上所述,分离纯化的三株菌株的多糖经过一系列手段进行结构的表征,发现多糖均具有羟基、羰基、亚甲基、碳骨架环等主要官能团,但分子量、单糖组成及糖苷键连接方式具有差异性。另外,S5多糖絮凝活性和对羟基自由基的清除活性最佳,F10对DPPH·自由基的清除活性最佳。