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树突状细胞(dendritic cells. DCs)是已知体内功能最强的专职的抗原呈递细胞(antigen presenting cells APC)。DCs能有效的摄取，加工及呈递抗原，并能刺激未致敏T细胞的增殖与活化，是启动、调控并维持体内特异性免疫诱导的中心环节。制备肿瘤特异性DCs疫苗免疫肿瘤患者，可以有效的激发特异性的持久的肿瘤免疫诱导。这已经成为肿瘤免疫治疗的一个热点，并在临床研究中取得了令人振奋的成果。 本研究评价了凋亡的卵巢癌细胞负载的DCs疫苗的主动免疫肿瘤作用，观察负载肿瘤抗原的DCs体外激活异体混合淋巴细胞效应和激活的细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte CTL)对卵巢癌细胞的杀伤效应，寻找最佳的DCs体外诱导途径及成熟调控，激发高效的抗卵巢癌免疫反应，DCs疫苗在动物试验中应用数量，次数及免疫途径，从而为临床试验奠定基础，为卵巢癌的生物治疗提供新的解决方案。 目的：制备人卵巢癌细胞系HO-8910细胞的凋亡细胞，用于负载脐血树突状细胞，评价AP-DC疫苗体外激活异体混合T细胞效应和激活的细胞毒性T细胞(CTL)对卵巢癌的杀伤效应，进一步评价AP-DC疫苗在SCID小鼠中的主动免疫治疗作用。 方法：采集健康足月孕妇的脐血，分离脐血单核细胞(cord blood mononuclear cell CBMNC)，用rhGM-CSF及rhTNF配合诱导分化为DCs，选取早期凋亡的卵巢癌细胞系HO-8910，负载CBMNC-DCs，体外用~3H-TdR掺入法测定肿瘤抗原负载的DCs对异体外周血混合T淋巴细胞的体外活化效应，MTT法检测活化的CTL对人卵巢癌细胞系HO-8910肿瘤细胞的杀伤作用，同时应用肿瘤抗原负载的DCs及单纯的肿瘤凋亡细胞，单纯的DCs开展SCID小鼠的主动免疫治疗，观察肿瘤的生长情况，以研究凋亡肿瘤细胞负载人单核来源的树突状细胞的生物学特性。 结果：脐血分离的CBMNC贴壁后在细胞因子rhGM-CSF、rhTNF-α配伍作用下体外诱导分化为具有典型形态和表型的DCs，以顺铂诱导人卵巢癌细胞凋亡后，取早期凋亡肿瘤细胞负载的DCs与异体混合T淋巴细胞体外共培养后，T细胞增殖加快，成功诱导出肿瘤特异性CTL。在效靶比1：10、1：50、1：100负载抗原的凋亡肿瘤细胞负载的脐血树突状细胞体外诱导抗卵果癌免疫反应______中文提要DCs刺激指数较未负载组刺激指数高，在10:1、5(l:1、100:1三种效靶比的杀伤效应实验中，抗原负载DCs活化的CTL较未负载流原和未激活组杀伤效率高，且随着效靶比的增加，杀伤率增大。采用TNF一Q刺激和培养基对照分布自己成熟的AP一DC疫苗均可抑制肿瘤生长，以TNF一Q刺激的疗效最佳(P<0.05)，与坏死肿瘤细胞负载的DCs疫苗疗效比较，同一病理类型凋亡仲瘤细胞负载的DC疫苗的疗效最佳(P<0.05)，与单纯的DCs及单纯凋亡细胞相比，顺铂诱发的凋亡肿瘤细胞负载人CBMNC一DC刺激机体T细胞和激发的CTL体外杀伤率最高。结论:CBMNC抗原在GM一CSF、IL一4、TNF一Q的作用下诱导分化为功能性的DCs，顺铂诱导的凋亡卵巢癌细胞负载DC(AP一DC)疫苗抗原有效的激活体外CTL，有效地诱导特异性抗卵巢癌免疫反应，有效抑制荷瘤小鼠肿瘤生长。