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体外受精－胚胎移植(In vitro fertilization-Embryo transfer,IVF-ET)中胚胎种植潜力较低一直是困扰人们的一个问题，近年来的一些研究认为囊胚扩张后透明带不破裂可能是种植失败的一个原因，于是提出人为地在透明带上打孔帮助胚胎孵出，即辅助孵出(Assisted Hatching，AH)的思想。辅助孵出提高妊娠率的基本原理引起人们广泛关注，热点主要集中在对透明带厚度和硬度的研究上。有作者提出胚胎透明带厚度(Zona pellucida thickness，ZPT)小的胚胎孵出时阻力减小，而透明带厚度变化率(Zona pellucida thickness variation，ZPTV)高的胚胎由于透明带上有一个明显薄的区域而使胚胎易于孵出；还有作者推测病人年龄、体外培养天数的增加及冷冻处理会增加透明带的硬度，使胚胎孵出困难。因此，对一些特殊病人进行透明带打孔或局部减薄提高ZPTV或许有助于胚胎孵出及种植；与此同时，多种辅助孵出方法也在被人们尝试使用，如机械切割法、酸化学溶解法和新近使用的激光烧灼法。然而，辅助孵出的临床效果仍存在着争议，焦点主要在于方法和病人的选择上，究竟哪些类型病人能从AH中受益及哪种方法更为科学是人们目前极为关注的问题。由于研究方法及材料来源有限，迄今为止，这些研究都还处于初始阶段，尤其是透明带硬度及激光薄化透明带辅助孵出的研究，国内尚未见报道。一种新型的1.48μm二极管激光系统因其精确、快速而为透明带物理特性的基础研究及辅助孵出的临床应用提供了条件。本研究即为应用这种激光系统及其精确的测量软件，对ZPT、ZPTV与妊娠结局的关系、体外培养胚胎透明带硬度的变化及激光薄化透明带进行辅助孵出的临床应用进行综合研究探讨，旨在为辅助孵出的病人选择、方法选择提供基础与临床理论依据。郑州大学2003届硕士毕业论文人胚胎透明带厚度、硬度与n下.ET妊娠结局的关系及傲光在辅助解出中的应用研究对象 所有研究材料均来自郑州大学第一附属医院生殖中心2002年4月一2002年8月间进行的IVF一ET周期;所有用于研究的捐赠或废弃的卵子胚胎均经患者知情同意。1.选择有培养3天新鲜胚胎移植的、胚胎形态摄像清楚的81个周期246个胚胎进行分析。其中常规IVF50个周期(153个胚胎)，ICSI31个周期(93个胚胎);2.选择53个ICSI周期中ICSI当日但。天)废弃的未成熟卵子32个，受精后第二天山2天)未受精卵子42个和第三天口3天)未受精卵子91个;62个IVT和41个ICsl周期中D3天移植后评分较低的In一W级不适宜冷冻的正常受精胚胎共127个，39个解冻周期中移植后废弃的m一W级胚胎97个。3.选择D3天移植后废弃的101个4细胞以上的11一111级胚胎，实验组(50个胚胎)用激光系统进行透明带薄化辅助孵出，对照组(51个胚胎)不做处理。研究方法1、用激光系统附带软件测量移植胚胎ZPT，计算zPTV值;2、用激光打孔仪测定激光能量与孔径关系;3、用激光打孔仪测定废弃卵子或胚胎透明带激光打孔最小有效能量;4、用激光打孔仪对胚胎进行透明带薄化辅助孵出，观察囊胚形成及孵出情况。5、体外受精一胚胎移植方法按我中心常规方案进行[ll。结果1.ZPT、ZPTV的临床相关性1.1常规IVF与ICSI周期移植胚胎zPT、zPTV的比较 常规I钾组(153个胚胎)与ICsl组(93个胚胎)即T分别为16.76土1.93林m，16.95士2.09脚，ZPTV分别为19.73士5.36%，19.68士5.46%，两组间差异无统计学意义(P>0.05)。l·2 zpT、zpTV与病人年龄的关系 ZPT、ZPTV随病人年龄的增长而减小，<3O岁组(91个胚胎)zPT为17.48士1.90林m，30一34岁组(103个胚胎)zpT为16.7肚1.96脚，之35岁组(52个胚胎)zPT为15 .97月.84林m，三组zPT值间差异有统计学意义尹<0.001;<3o郑州大学2003届硕士毕业论文人胚胎透明带厚度、硬度与八下.ET妊娠结局的关系及激光在辅助解出中的应用岁组ZpTV(2 1 .22土4.13%)大于30一34岁组(20.14士5.9x%)，但无统计学上差异护=0.14>0.05)，30一34岁组zPTV(20.14士5.91%)大于七35岁组(16.23上4.78%)，其差异有统计学意义尹<0.001。L3 ZPT、zPTV与妊娠结局的关系 妊娠组(87个胚胎)zpT(1 6.71坟.10脚)与未妊娠组(159个胚胎)ZpT (17.06士1.75林m)间差异无统计学意义(P) 0.05);妊娠组zPTv(21.73士5.61%)显著大于未妊娠组(18.61士4.90%)，差异有统计学意义(P<0.005)。移植胚胎平均ZPTV值七20%组的妊娠率(50.。%)高于移植胚胎平均zPTV值<20%组的妊娠率(17.1%)，差异有统计学意义(P<0.05)。1 .4优质胚胎(移植胚胎)与劣质胚胎(废弃胚胎)ZPT、ZPTV间的关系 优质胚胎组(246个胚胎)ZPT(16.84士1 .99脚)与劣质胚胎组(127个胚胎)ZPT(17.11士2.04卜m)间差异无统计学意义(P)0.05);但优质胚胎组zPTv (19.71士5.39%)大于劣质胚胎组(16.6肚5.42%)，差异有统计学意义(尸<0.001)2.激光能量与孔径关系 激光能量与与所打孔孔径间存在明显的直线正相关关系，相关系数乙，二0 .96，P=0.0003.不同胚胎透明带硬度的比较3‘1新鲜未受精卵子体外不同培养天数时最小有效激光打孔能量的变化: 第2天组(42个胚胎)打孔?