【摘 要】
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目的:在观察Ce6-PDT对人结肠癌SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路及微丝骨架影响的基础之上,进一步靶向干扰Rac1基因,探讨Ce6-PDT抑制人结肠癌SW620细胞迁移中Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin通路所发挥的信号转导作用,以期发现Ce6-PDT抑制结肠癌迁移的靶分子,提供Ce6-PDT抑制结肠癌转移的实验依据和理论基础。方法:1.MTT法检
【基金项目】
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自治区自然科学基金计划项目“基于 Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路探讨二氢卟吩e6光动力抑制结肠癌SW620细胞迁移机制”；
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目的:在观察Ce6-PDT对人结肠癌SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路及微丝骨架影响的基础之上,进一步靶向干扰Rac1基因,探讨Ce6-PDT抑制人结肠癌SW620细胞迁移中Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin通路所发挥的信号转导作用,以期发现Ce6-PDT抑制结肠癌迁移的靶分子,提供Ce6-PDT抑制结肠癌转移的实验依据和理论基础。方法:1.MTT法检测Ce6-PDT后人结肠癌SW620细胞的存活率;2.采用划痕实验检测Ce6-PDT以及RNAi联合Ce6-PDT后人结肠癌SW620细胞的迁移能力;3.采用扫描电镜观察Ce6-PDT后人结肠癌SW620细胞伪足;4.采用免疫荧光和激光共聚焦技术观察Ce6-PDT后人结肠癌SW620细胞微丝骨架F-actin在细胞内分布、聚合情况;5.Western Blot检测Ce6-PDT以及RNAi联合Ce6-PDT后人结肠癌SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路相关蛋白和微丝骨架蛋白F-actin的表达水平。结果:1.与对照组未经处理的人结肠癌SW620细胞相比,Ce6-PDT处理的细胞存活率降低（P<0.05）;2.与对照组未经处理的人结肠癌SW620细胞相比,Ce6-PDT处理的细胞迁移能力减弱（P<0.05）;3.与对照组未经处理的人结肠癌SW620细胞相比,Ce6-PDT处理的细胞伪足减少或消失;4.人结肠癌SW620细胞微丝骨架F-actin主要分布于细胞核周围,未经处理的细胞F-actin呈聚合状态,Ce6-PDT导致其解聚、分布混乱以及细胞核碎裂;同时,Ce6-PDT后微丝骨架蛋白F-actin表达量降低（P<0.05）;5.Ce6-PDT后,人结肠癌SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路相关蛋白Rac1和p-cofilin表达量降低（P<0.05）;6.RNAi和Ce6-PDT联合干扰后,人结肠癌SW620细胞迁移能力进一步减弱（P<0.05）;7.RNAi的联合干扰一定程度上影响Ce6-PDT对SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路相关蛋白表达的调控（P<0.05）。结论:1.Ce6-PDT抑制人结肠癌SW620细胞存活率和迁移能力,并导致细胞伪足减少或消失;2.Ce6-PDT导致结肠癌SW620细胞微丝骨架F-actin解聚、细胞核碎裂,并且抑制微丝骨架蛋白F-actin的表达;3.Ce6-PDT一定程度上下调人结肠癌SW620细胞Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路;4.结肠癌SW620细胞中,Rac1/PAK1/LIMK1/cofilin信号通路可能参与Ce6-PDT抑制细胞迁移的过程。
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