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目的：为探讨毒蕈碱型乙酰胆碱受体（muscarinic acetylcholine receptor）在吗啡依赖过程中的作用机制，本研究从脊髓水平分析吗啡依赖过程中m1-5的表达特征，观察了侧脑室或鞘内注射m1-5特异性反义寡脱氧核苷酸（A-olig）对吗啡戒断症状的影响，明确介导吗啡依赖过程的毒蕈碱受体亚型。通过分析吗啡依赖过程中M受体对脊髓一氧化氮途径、肾上腺素能途径和谷氨酸-NMDA受体途径等的调节，并观察鞘内注射m受体亚型A-olig对导水管周围灰质区（PAG）谷氨酸释放以及对脊髓m（1-5）、nNOS、NR1A和α2基因表达的影响，从而探索M受体调节吗啡依赖的作用途径和神经生物学机制。还观察鞘内注射GDNF、BDNF或NGF的A-olig对吗啡戒断反应的影响，以探讨吗啡依赖与神经元的适应。 方法：逐日递增吗啡剂量建立大鼠吗啡依赖模型，戒断症状评分根据纳洛酮注射后1h内的各项症状的分值；观察鞘内注射M受体拮抗剂、NMDA受体拮抗剂、NOS抑制剂、可透过细胞膜的PKA激活剂、抑制剂以及蛋白磷酸酶抑制剂等对吗啡戒断症状的影响；应用lipofectin AMINE转染nNOS、eNOS、m1-5、NR1A、a2、GDNF、BDNV和NGF的A-olig，观察这些基因的A-olig对吗啡戒断症状的影响。应用比色法测定NO含量，利用酶促动力反应测定NOS活力，鸟苷酸环化酶的基础活力测定根据酶催化底物GTP生成cGMP含量计算，微透析样品的谷氨酸浓度测定应用FITC衍生标记产生荧光物质，然后用高效毛细管电泳激光诱发荧光测定。应用高效液相色谱仪测定去甲肾上腺素含量，腺苷酸环化酶活力根据酶催化底物ATP生成cAMP含量计算；放射免疫法测定cAMP和cGMP的含量；PKA活力的测定根据有无cAMP存在情况下，γ-32P-ATp中的32P掺入组蛋白的量的差异来计算酶活力。以β-actin mRNA为内标，RT-PCR方法检测m1-5、nNOS、iNOS、eNOS、NR1A、NR2A和α2的mRN□，并进行半定量分析。 结果：1．鞘内或腹腔注射纳洛酮激发吗啡大鼠戒断症状的各项评分值之间没有明显差异，腹腔或鞘内注射东莨菪碱或pirenzepine均明显减轻吗啡戒断症状。吗啡依赖大鼠脊髓m1、m2、m3、m4和m5受体mRNA的扩增产物较对照组明显提高，