甘露清凉饮对金黄地鼠颊癌细胞凋亡基因bax/bcl-2表达的影响

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目的:口腔颌面部鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤之一,复发率及淋巴转移率较高,预后差,使人类的身体健康受到威胁。甘露清凉饮是由黄芩,石斛,枇杷叶,茵陈等组成,其组方中的多种成分都有抗肿瘤的作用。为了解甘露清凉饮对口腔鳞状细胞癌的作用,本研究选用DMBA诱导的金黄地鼠颊癌动物模型,分析甘露清凉饮对颊黏膜鳞状细胞癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用的可能机制。方法:实验对象为85只6~8周龄、体重约100 g的叙利亚金黄地鼠,雌雄兼备,取10只为空白对照组,不作任何处理;其余75只金黄地用0.3%DMBA注射右侧颊囊12周,第13周时采用随机数字表法将地鼠分为3个用药组和1个模型对照组(每组15只),低剂量甘露清凉饮组、中剂量甘露清凉饮组及高剂量甘露清凉饮组分别灌服7.5、15、30 g/kg的甘露清凉饮4周,模型对照组不做任何处理。第17周处死全部动物,切取肿瘤组织,应用流式细胞技术检测甘露清凉饮对金黄地鼠颊黏膜鳞状细胞癌细胞周期和凋亡的影响,采用实时荧光定量PCR检测甘露清凉饮对癌组织Bax和Bcl-2 m RNA表达的影响。所有数据均采用SPSS13.0统计软件,P<0.05具有统计学意义。结果:1甘露清凉饮治疗后,低、中、高剂量组癌组织细胞周期中的G0/G1期细胞比例分别为45.7±0.3%、49.4±0.5%、62.8±0.6%;S期细胞比例分别为26.1±0.3%、21.5±0.4%、19.7±0.7%;G2/M期细胞比例分别为28.2±0.4%、29.1±0.3%、17.5±0.4%;随着甘露清凉饮浓度的增加,G0/G1期细胞分布比例升高(P<0.01),S期和G2/M期的细胞降低(P<0.01)。2甘露清凉饮治疗后,经流式细胞仪检测,低、中、高剂量组凋亡率(亚倍体峰)分别为15.02±0.26、19.91±0.34、30.38±0.57,与模型对照组的11.72±0.19比较,其凋亡率(亚倍体峰)逐渐增加,各组差异均具有统计学意义。3甘露清凉饮治疗后,低、中、高剂量组癌细胞Bax m RNA的表达量分别为1.45±0.38、4.30±0.65、12.52±0.53;Bcl-2 m RNA的表达量分别为3.56±0.22、1.48±0.11、1.02±0.09。差异有统计学意义(P<0.05),而且Bax及Bcl-2 m RNA的表达具有剂量依赖性。结论:1甘露清凉饮可以抑制颊黏膜鳞状细胞癌的细胞增殖,改变细胞周期,将细胞周期阻滞于G0/G1期。2甘露清凉饮可能是通过下调Bcl-2的表达和上调Bax的表达来诱导颊黏膜鳞状细胞癌细胞凋亡。3甘露清凉饮可以通过抑制癌细胞增殖和诱导癌细胞凋亡达到抗肿瘤的作用,有望成为临床上治疗口腔鳞状细胞癌的新药物。
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