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雌激素是人体内一种重要的内源性物质,介导许多重要的生理功能。雌激素异常是乳腺癌等疾病的重要诱因之一。机体内,雌激素过量是诸多肿瘤如乳腺癌、子宫内膜癌发生、发展、转移等直接因素,而雌激素缺乏则常常导致骨质疏松、冠心病、阿尔茨海默症等老年疾病。因此开发微量雌激素及其代谢产物的定量检测方法对于预防治疗雌激素相关疾病具重要的作用。对于雌二醇的检测分析,前人进行了大量研究工作,但这些方法的缺陷使其不适用大批量样品检测。我们设计了基于荧光素酶(Gluc)和SNAP-tag标记技术的雌二醇检测方法。首先成功地从大肠杆菌中表达出可溶性的M43I-L3-SNAP融合蛋白。并通过活性检测发现,该融合蛋白既能表现出荧光素酶生物发光的功能,其SNAP部分又能与BG-biotin发生标记反应。随后证明了BG-biotin对M43I-L3-SNAP的标记并不影响荧光素酶的活性,最后证明M43I、SNAP融合蛋白能够标记BG-E2。 SHP-2是由PTPN11基因编码的一种非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶。SHP-2参与了生长因子和细胞因子信号并调控Ras/Mek1/MAPK及其它多条信号通路。生殖细胞或者体细胞的SHP-2突变会超激活SHP-2催化活性,导致努南综合征和多种儿童白血病的产生。在多种恶性肿瘤中也发现了SHP-2的异常高表达。因此,发现新型的SHP-2抑制剂对于疾病病理机制的研究和药物开发具有重要意义。我们建立了SHP-2抑制剂筛选模型,成功运用该模型筛选出多个SHP-2抑制剂。深入研究了黄烷酮和三萜化合物的细胞活性,及对蛋白酪氨酸磷酸酶(proteintyrosine phosphatases,PTPs)蛋白选择性,并运用免疫印迹和细胞热转移等手段证实了小分子与SHP-2蛋白的靶向结合。