目的:探讨Pokemon沉默对乳腺癌细胞(T47D、MCF7)C-myc表达的影响及其作用机制,并分析两者的临床关联性。方法:实验分为三个部分。第一部分:以体外培养的乳腺癌细胞T47D、MCF-7为实验对象,设计特异性沉默Pokemon的si RNA和阴性对照Scrambled si RNA(NC),瞬时转染Pokemon si RNA或阴性对照Scrambled si RNA至以上两种乳腺癌细胞中,通过q RT-PCR和western blot技术分别检测Pokemon si RNA对Pokemon的沉默效果;构建Pokemon沉默的T47D、MCF-7细胞系,通过q RT-PCR和western blot技术分别检测沉默Pokemon对C-myc核酸表达水平和蛋白表达水平的影响。第二部分:构建C-myc启动子序列,瞬时转染C-myc启动子质粒至T47D和MCF-7细胞中,通过双荧光素酶报告基因活性技术检测该启动子的活性强度。然后将C-myc启动子质粒分别与Pokemon si RNA和Scrambled si RNA瞬时共转染至T47D、MCF-7细胞中,通过双荧光素酶报告基因活性技术检测阴性对照组与实验组共转染细胞中C-myc启动子的活性,从而进一步研究Pokemon对C-myc的作用机制。第三部分:通过组织芯片结合免疫组化的方法检测100例人乳腺浸润性导管癌组织及10例癌旁组织中Pokemon及C-myc的表达情况,从而进一步分析两者的临床关联性。结果:1.Pokemon对乳腺癌细胞(T47D、MCF7)中C-myc表达的影响:Pokemon沉默抑制T47D、MCF-7细胞中C-myc m RNA转录水平及蛋白表达水平。2.Pokemon对乳腺癌细胞(T47D、MCF7)中C-myc的作用机制:Pokemon沉默可降低T47D、MCF-7细胞中C-myc启动子的活性。3.Pokemon与C-myc在临床上的关联性:对100例人乳腺浸润性导管癌组织进行免疫组织化学法分析,发现Pokemon与C-myc的表达呈正相关,差异有统计学意义(R=0.464,p=0.000)。结论:1.沉默Pokemon能抑制乳腺癌细胞中C-myc的表达,其机制可能与下调C-myc启动子的活性有关。2.在人乳腺癌组织中,Pokemon与C-myc的表达呈正相关。